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一、概述

Epoxy 活化瓊脂糖磁珠（Magarose-Epoxy）是的活化好的磁珠，它采用平均粒徑為20-45μm 的6%高度交聯瓊脂糖凝膠，表面用大分子糖鏈接枝，使它有更高的比表面積和更好的生物兼容性，用它合成的親和磁珠，它避免蛋白之間位阻以及蛋白和填料的位阻干擾，使其同等配基下有更高載量，同時有更好的分辨率。由于比表面積大，平衡和洗脫的時間也更短。它經過接枝即使是純化病毒，抗體等大分子的物質，載量基本保持不變。可以在水相或者有機相中偶聯，提供的該Epoxy 瓊脂糖磁珠已經完全溶脹為即用凝膠磁珠。

二、產品特性

注：磁珠蛋白結合量與目標蛋白特性相關，此處僅作參考值。

三、使用方法

1. 產品特點

  偶聯條件溫和（pH8-10，溫度4-45℃，時間1-16小時，可以在水相或有機相中偶聯），偶聯效率高（配基密度60-70 μmol/mL）。

  磁珠不需要處理，直接計算合適的量用于偶聯，縮短時間。

  保存時間長，-20℃可以保存2年，不能夠受潮。

  剛性強，流速快(300 cm/h，100 kpa)。

 可偶聯含有氨基、巰基、羥基的多糖，蛋白，核酸，抗體等配基，應用范圍廣。

 偶聯后制備的親和填料壽命長，流速快，特異性高。

2. 蛋白偶聯操作步驟

以用該Epoxy 瓊脂糖磁珠偶聯牛血清白蛋白（BSA）為例：

1)        取20 ml活化瓊脂糖磁珠，磁分離，50ml去離子水洗滌三次。磁分離，去除上清。

2)        取BSA 100 mg 溶解于10 mL的pH9.0的 0.25M 碳酸鈉緩沖液中。

3)        將BSA 溶液加入磁珠中混合，在搖床上振蕩，25℃偶聯6小時。

4)        然后加50 mg 甘氨酸，再反應6個小時封閉剩余的基團。

5)        偶聯了BSA 的磁珠，用1 M NaCl 溶液洗3-5次，收集偶聯后剩余的液體以及洗滌的溶液測定BSA 的總量，再用純水洗滌磁珠3次，最后將磁珠保存在相應蛋白保存緩沖液中。

6)        BSA 的偶聯量為25 mg/ml. 計算方法：BSA 的吸附載量=（G0—G1）/V。

G0：BSA 總使用量，單位：mg；

G1：偶聯反應后未偶聯的 BSA 的量，單位：mg；

V：填料的體積，單位：mL；

注：該偶聯方法可用于偶聯單抗及其它蛋白，均能獲得很好的偶聯效果。偶聯的物質如果是小分子的例如氨基酸或其他帶-NH₂、-SH、-OH等基團的小分子配基，那可以直接把配基加到0.05M NaOH中配置成10-20mg的溶液，其他條件不變。也可以提高偶聯的溫度，這樣可以偶聯密度更高。