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1M山梨醇溶液/酵母電轉(zhuǎn)感受態(tài)細胞制備液

1M Sorbitol Solution

貨號 規(guī)格 數(shù)量 價格
Q-0061305 100mg
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Q-0061305 250mg
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業(yè)務(wù)范圍:AIE材料 | 熒光產(chǎn)品 | MOF產(chǎn)品 | 二維納米 | 糖化學(xué) | 凝集素 | PEG
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產(chǎn)品介紹

1M的山梨醇一般用于釀酒酵母或者裂殖酵母電轉(zhuǎn)感受態(tài)的制備。

酵母感受態(tài)細胞的制備:

1.活化菌種。-80℃保存的菌種在固體YPDA培養(yǎng)基(YPDA加20g Agar/L)上劃線,在30℃培養(yǎng)2-4天。

2.挑取酵母單菌落在固體YPDA培養(yǎng)基上劃3-5 mm的短線,在30 ℃培養(yǎng)2-4天。待酵母單菌落長至2 mm長時,接種。

3.**把酵母細胞接種到50 ml液體YPDA培養(yǎng)基的三角瓶中繼續(xù)培養(yǎng),待OD600到1.3-1.5范圍內(nèi)。

4.將酵母菌置于冰上放置10 min后,收集細胞。1000 g,離心5 min, 去上清。

5.沉淀用30-50 ml的預(yù)冷的無菌水懸浮。1000 g,離心5 min,去上清。重復(fù)洗滌2次。

6.沉淀用5mL 冰上預(yù)冷的1M 山梨醇溶液重懸。1000 g,離心5 min,去上清。

7.沉淀用0.4 mL 的預(yù)冷的1M 山梨醇溶液重懸,按照40 uL 分裝。

酵母轉(zhuǎn)化:

1.在40uL 的酵母感受態(tài)細胞中,加入5uL(100ng)的質(zhì)粒,混勻。

2.轉(zhuǎn)移到預(yù)冷的電轉(zhuǎn)槽中,電擊。

3.在電轉(zhuǎn)槽中加入500uL 預(yù)冷的1M 山梨醇溶液,輕柔混勻。

4.涂布于相應(yīng)的篩選培養(yǎng)基上,28-30℃培養(yǎng)3-5天。

 

參數(shù)信息
外觀狀態(tài): 固體或粉末
質(zhì)量指標: 95%+
溶解條件: 有機溶劑/水
CAS號: N/A
分子量: N/A
儲存條件: -20℃避光保存
儲存時間: 1年
運輸條件: 室溫2周
生產(chǎn)廠家: 西安齊岳生物科技有限公司
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