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一文帶你了解6-異硫氰酸熒光素 或 6-FITC和5-FITC
發布時間:2020-10-29     作者:zhn   分享到:

熒光染料是指吸收紫外線或可見光后發射波長較長的可見光的物質,大多是含有苯環或雜環并帶有共軛雙鍵的化合物。其用途廣泛,醫學上可用于進行基因檢測、分類與識別,尤其在單分子技術中。熒光染料也起到了重要作用由于其高靈敏度、操作方便等優點熒光染料作為標記物已廣泛應用于熒光免疫、熒光探針、細胞染色等多個方面。很多單分子技術,如熒光共振能量轉移、雙光子融合技術等,運用染料分子來標記待測物質,測得其熒光光譜從而闡述DNA轉錄、RNA聚合、動力蛋白和蛋白質折疊機理。


西安齊岳生物科技有限公司是的核酸染料,CY染料,各種熒光染料供應商,西安齊岳供應的染料產品種類齊全,我們可以提供FITC、Rhodamine、Bodipy系列染料、Coumairn 染料、Dansyl染料、FAM/5-TAMRA、NBD、CY系列、ICG及IR系列、ATTO系列染料、AMCA、Perylene、碘化物、DIR/DIL/DIO/DID/DAPI細胞膜染料、ROX參比染料等等。齊岳生物各種熒光染料的定制標記服務.我們可以根據客戶需求設計和合成定制染料,齊岳生物提供的熒光染料的吸收波長和發射波長從300nm-810nm不等,同時提供在不同的熒光染料上面做活性基團,比如NHS、amine,azide,COOH,alkyne,Maleimide,Biotin等等。其中常見的染料是FITC熒光素。下面帶你了解6-異硫氰酸熒光素 或 6-FITC和5-FITC


一、FITC的特性

異硫氰酸熒光素(FITC)呈黃色、橙黃色或褐黃色粉末或結晶,性質穩定,在室溫下能保存兩年以上,在低溫中可保存多年。易溶于水和酒精。吸收光譜為490~495nm,發射光譜為520~530nm,呈現黃綠色熒光,分子量為398.4.

在堿性條件下(pH8.5以上),FITC的異硫酸基在水溶液中與免疫球蛋白的自由氨基經碳酰胺化而形成硫碳氨基鍵,成為標記熒光免疫球蛋白,即熒光抗體。一個Ig分子上能標記15~20個FITC分子。

FITC有兩種異構體:

異構體 I, 即 5-異硫氰酸熒光素 或 5-FITC

異構體 II, 即 6-異硫氰酸熒光素 或 6-FITC

異硫氰酸熒光素通常是由其中一種異構體或者有時是兩種異構體的混合物構成(混合物的CAS編號為27072-45-3)。早在1942年,FITC首次用于抗體標記。[1]

由于異硫氰酸酯基團的存在以及其高熒光性,FITC常用于蛋白質或多糖等多種底物的標記試劑。異硫氰酸酯在溫和條件下與親核試劑,例如胺,極易反應。

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圖1. FITC異構體1的結構式。FITC異構體1 (5-異硫氰酸熒光素) 在5位上含異硫氰酸酯基團。


光譜性質:

FITC在λ= 495 nm處有激發波長,在λ = 519 nm處有發射波長 (參見圖2) [2]。.該化合物是黃色的,而發射光則是綠色的。FITC兩種異構體的激發和發射波長的差別是很小的。FITC標記的功能性生物聚合物,如FITC標記葡聚糖,具有與母體分子相似的激發和發射特性,使FITC成為熒光標記的理想載體。

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圖 2. FITC異構體I的激發(橙色) 和發射(藍色)光譜。在495 nm處有大激發波長,在 519 nm處有大發射波長。


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