UDP糖|horikoshii焦球菌UDP-葡萄糖4-異丙基酶的表征:海藻糖雙酶系統再生UDP制備UDP-半乳糖
克隆了一種編碼horikoshii焦球菌udp -葡萄糖4-異丙基酶(pgal)的基因,并在大腸桿菌中進行了表達。
純化后的酶可可逆催化UDP-Gal和UDP-Glc的合成,但對UDP-Gal結合的選擇性提高了約10倍。
**pH值和溫度分別為6.5℃和65℃。該酶在沒有添加煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)的情況下**,可能是由于存在緊密結合的NAD+。
特別是,pGALE可以與堀越菇的海藻糖合成酶(TreT)結合,從UDP再生UDP- gal。
糖基轉移酶可能的副產物UDP可與海藻糖經TreT轉化為UDP- glc,而pgal可同時將UDP- glc轉化為UDP- gal。
綜上所述,pGALE和TreT加海藻糖是一種**的一鍋兩酶系統,可再生半乳糖基轉移酶的高成本底物UDP-Gal,完成一個糖核苷酸循環。
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