UDP糖|枯草芽孢桿菌udp -糖基轉(zhuǎn)移酶催化甘草次酸糖基化的新方法
甘草次酸(Glycyrrhetinic acid, GA)是一種具有多種生物活性和藥理表現(xiàn)的五環(huán)疏水苷元。GA除具有**的生物活性外,其疏水性也有一定的局限性,可通過糖基化來解決。本研究選擇枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis, B. subtilis)的UGTs (YojK, YdhE, UGT109A1)在大腸桿菌(Escherichia coli, E.coli)中進行重組表達,并對其進行純化,通過催化原生底物GA來評價其潛在的生物活性。UGT109A1和YojK對GA與UDP-Glucose (UDP-Glu)的糖基化反應(yīng)表現(xiàn)出催化活性,分別合成GA-3- o -β-d-葡萄糖苷和GA-30- o -β-d-葡萄糖苷,被認為是GA的強效衍生物,具有較高的水溶性和生物活性。重組UGT109A1在50?°C、pH 10.0時表現(xiàn)出**的活性,而重組YojK在35?°C、pH 8.0時表現(xiàn)出**的反應(yīng)條件。UGT109A1和YojK的催化效率(kcat/Km)表明其對GA糖基化具有較好的生物催化作用。
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