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udp 糖|擬南芥udp -糖焦磷酸化酶:兩個異構(gòu)體的證據(jù)
擬南芥udp 糖焦磷酸化酶(AtUSP, EC 2.7.7.64)是一種廣泛的底物焦磷酸化酶,具有GlcA-1-P、Gal-1-P和Glc-1-P活性。
利用重組擬南芥udp 糖焦磷酸化酶AtUSP的多克隆抗體進行免疫印跡,發(fā)現(xiàn)擬南芥組織粗提物中存在兩個約70 kDa (USP1)和66 kDa (USP2)的USP異構(gòu)體。
該66kda亞型不是提取過程中USP1蛋白裂解的結(jié)果。
在SDS凝膠上胰蛋白酶消化的條帶對應(yīng)于兩個異構(gòu)體的位置,然后串聯(lián)質(zhì)譜證實USP肽存在于兩個條帶中。
兩種USP異構(gòu)體在細胞溶膠中被檢測到,作為由差異離心獲得的細胞組分的免疫印跡確定。
然而,在微粒體部分也檢測到一些USP1。
免疫沉淀試驗表明,AtUSP抗體去除小花提取物中USP活性(UDP-GlcA→GlcA-1-P)。
這些結(jié)果表明USP是**一種利用udp 糖作為底物的焦磷酸化酶,它可能是肌醇氧化途徑的末端酶。
UDP-L-RhaNAc | UDP-4n-D-FucNAc |
UDP-D-XylNAc | UDP-VioNAc |
UDP-2-Biotinyl-GalNAc | UDP-6-Biotinyl-GalNAc |
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