產品名稱：生物素標記煙曲霉素，Biotinylated Cycloheximide，Fumagillin的生物素標記策略

生物素標記策略

1. 標記位點選擇

Fumagillin：

環氧環：反應活性高，但可能破壞生物活性，需謹慎選擇。

羥基/氨基：優先選擇分子末端的羥基（如C-22位）或引入氨基接頭，通過酰胺鍵或酯鍵連接生物素。

Cycloheximide：

氯代苯基：可通過親核取代反應引入接頭（如氨基或羧基）。

環己酮：需保護酮基，避免副反應。

2. 化學偶聯方法

直接標記：

NHS-生物素：適用于含氨基的Fumagillin衍生物，在pH 7-8條件下形成穩定酰胺鍵。

生物素-馬來酰亞胺：若Fumagillin含巰基（如通過半胱氨酸修飾），可通過邁克爾加成反應偶聯。

間接標記：

引入接頭：使用聚乙二醇（PEG）或己二酸二酰肼（ADH）作為間隔臂，提高標記物的水溶性和靈活性。

點擊化學：通過疊氮化物-炔烴環加成反應（CuAAC或SPAAC）實現高效、特異性標記。

3. 標記效率優化

反應條件：

溫度：室溫至40℃，避免高溫導致Fumagillin降解。

溶劑：DMSO或DMF（需控制比例，防止蛋白質變性）。

pH：中性至弱堿性（pH 7.5-8.5），促進酰胺鍵形成。

純化方法：

HPLC（C18柱）：分離未反應的生物素和副產物。

透析或超濾：去除小分子雜質，獲得高純度標記物。

溫馨提示：僅用于科研，不能用于人體實驗！wyh

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