產(chǎn)品名稱：生物素標(biāo)記氨基己酸，生物素?；?6-氨基己酸的合成條件與步驟

合成條件與步驟

1 試劑與材料

生物素（C??H??N?O?S）

6-氨基己酸（C?H??NO?，純度≥98%）

EDC（偶聯(lián)劑）

NHS（穩(wěn)定劑）

MES緩沖液（pH 5.0，提供適宜的酸性環(huán)境）

透析袋（MWCO 1 kDa）或高效液相色譜（HPLC）系統(tǒng)

2 反應(yīng)條件

緩沖體系：MES緩沖液（pH 5.0），確保羧酸基團(tuán)的有效活化。

溫度與時間：室溫（20-25℃）下反應(yīng)4小時，避光攪拌以防止生物素分解。

試劑濃度：

生物素與6-氨基己酸的摩爾比為1:1。

EDC濃度為10 mM，確保充分活化羧酸基團(tuán)。

3 合成步驟

活化生物素：

將生物素溶解于MES緩沖液中，加入EDC和NHS，室溫下反應(yīng)30分鐘以活化羧酸基團(tuán)。

偶聯(lián)反應(yīng)：

加入6-氨基己酸，繼續(xù)室溫反應(yīng)4小時，形成酰胺鍵。

純化：

透析法：將反應(yīng)液裝入透析袋（MWCO 1 kDa），用PBS緩沖液透析24小時，更換緩沖液3-4次以去除未反應(yīng)試劑。

HPLC法：使用C18柱進(jìn)行反向色譜分離，流動相為乙腈-水（含0.1% TFA），檢測波長214 nm。

驗證：

質(zhì)譜（MS）：確認(rèn)產(chǎn)物分子量為454.5 g/mol（與理論值一致）。

核磁共振（NMR）：驗證酰胺鍵的特征峰（δ 7.8-8.0 ppm）。

溫馨提示：僅用于科研，不能用于人體實驗！wyh

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