產(chǎn)品名稱：FITC-streptavidin，異硫氰酸酯熒光素-鏈霉親和素的制備方法

一、FITC-streptavidin的特性

高熒光強(qiáng)度與穩(wěn)定性：

FITC-streptavidin繼承了FITC的強(qiáng)熒光特性，同時(shí)由于鏈霉親和素的四聚體結(jié)構(gòu)，可結(jié)合多個(gè)FITC分子，進(jìn)一步增強(qiáng)熒光信號(hào)。

FITC與鏈霉親和素的共價(jià)結(jié)合提高了熒光標(biāo)記的穩(wěn)定性，減少了熒光淬滅和脫落。

高親和力與特異性：

FITC-streptavidin保留了鏈霉親和素對(duì)生物素的高親和力，可特異性結(jié)合生物素標(biāo)記的抗體、核酸或其他分子，實(shí)現(xiàn)信號(hào)的放大和檢測(cè)。

適用于多種生物檢測(cè)體系，如ELISA、免疫熒光、流式細(xì)胞術(shù)等。

生物相容性與低背景：

鏈霉親和素具有良好的生物相容性，F(xiàn)ITC-streptavidin在生物體內(nèi)應(yīng)用時(shí)毒性較低，安全性較高。

由于鏈霉親和素?zé)o糖基化，非特異性結(jié)合較少，背景信號(hào)低，提高了檢測(cè)的靈敏度和準(zhǔn)確性。

二、FITC-streptavidin的制備方法

FITC-streptavidin的制備通常涉及以下步驟：

鏈霉親和素的準(zhǔn)備：

從鏈霉菌中提取鏈霉親和素，或通過(guò)基因工程技術(shù)表達(dá)重組鏈霉親和素。

純化鏈霉親和素，去除雜質(zhì)和未結(jié)合的配體。

FITC與鏈霉親和素的偶聯(lián)：

將FITC溶解在適當(dāng)?shù)娜軇┲校ㄈ鏒MSO），并稀釋至適當(dāng)濃度。

在堿性條件下（如pH 9.0-9.5的碳酸鹽緩沖液），將FITC溶液與鏈霉親和素溶液混合，發(fā)生共價(jià)結(jié)合反應(yīng)。

反應(yīng)條件需優(yōu)化，以控制FITC與鏈霉親和素的摩爾比，避免過(guò)度標(biāo)記導(dǎo)致鏈霉親和素活性下降。

純化與鑒定：

通過(guò)透析、柱色譜或HPLC等方法純化FITC-streptavidin，去除未結(jié)合的FITC和其他雜質(zhì)。

使用紫外-可見分光光度計(jì)測(cè)定FITC-streptavidin的吸收光譜，確認(rèn)FITC的成功標(biāo)記。

通過(guò)SDS-PAGE或Western blot驗(yàn)證鏈霉親和素的完整性。

溫馨提示：僅用于科研，不能用于人體實(shí)驗(yàn)！wyh

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