BODIPY 558/568 NHS酯(Boron-dipyrromethene 558/568 N-hydroxysuccinimide ester)是一種廣泛應(yīng)用于生物標記和熒光成像的紅色熒光染料活性酯,具有優(yōu)異的光學(xué)性質(zhì)和生物相容性。
該分子結(jié)構(gòu)基于BODIPY核心結(jié)構(gòu),并在其上修飾了適合偶聯(lián)反應(yīng)的NHS酯基團,使其可以與含伯胺(-NH?)的生物大分子如蛋白質(zhì)、肽類或核酸等高效共價連接。
英文名 BDP 558/568 NHS ester
CAS號 150173-73-2
分子量 443.23
分子式 C20H16BF2N3O4S
熔點 N/A
結(jié)構(gòu)特性與化學(xué)性質(zhì)
BODIPY類染料具有中心硼原子與二吡咯結(jié)構(gòu)穩(wěn)定配位形成的剛性共軛體系,這賦予其高度穩(wěn)定的熒光特性。BODIPY 558/568具有中等偏紅的激發(fā)和發(fā)射波長,適合用于激光掃描共聚焦顯微鏡、流式細胞術(shù)和多重免疫熒光實驗中。
其NHS酯基團能夠與伯胺發(fā)生快速而高效的酰胺鍵形成反應(yīng),尤其適用于生物大分子標記,如:
蛋白質(zhì)(如IgG、streptavidin等)
肽類
寡核苷酸(含氨基修飾)
NHS酯在中性至弱堿性(pH 7.2–8.5)條件下具有良好的反應(yīng)性,常用的緩沖體系包括PBS、碳酸鹽緩沖液等,需避免一級胺或高濃度水中使用以減少水解。
應(yīng)用領(lǐng)域
蛋白質(zhì)標記
利用NHS酯與蛋白分子表面賴氨酸殘基反應(yīng),制備熒光標記蛋白,如標記抗體用于免疫熒光檢測。
細胞追蹤
可用于標記膜蛋白或胞內(nèi)蛋白,追蹤細胞內(nèi)運送途徑或細胞分布。
核酸探針構(gòu)建
與氨基修飾的寡核苷酸反應(yīng),制備熒光DNA探針,用于原位雜交(FISH)等。
流式細胞術(shù)(FACS)
標記細胞表面抗原后進行熒光強度分析和細胞分選。
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