FITC異硫氰酸熒光素

FITC（異硫氰酸熒光素）——經(jīng)典綠色熒光標(biāo)記試劑用于氨基修飾生物分子

一、產(chǎn)品簡(jiǎn)介

FITC（Fluorescein Isothiocyanate）是一種廣泛使用的綠色熒光染料，分子式C21H11NO5S，分子量389.4。其結(jié)構(gòu)中含有異硫氰酸酯（–N=C=S）活性基團(tuán)，能夠與蛋白質(zhì)、肽鏈以及多種含有氨基的分子形成穩(wěn)定的共價(jià)鍵，因而廣泛用于生物標(biāo)記和免疫檢測(cè)領(lǐng)域。

FITC具有較高的熒光量子產(chǎn)率和良好的光穩(wěn)定性，激發(fā)波長(zhǎng)約495 nm，發(fā)射波長(zhǎng)約520 nm，呈鮮明的綠色熒光，是免疫熒光染色、細(xì)胞追蹤、分子成像等科研領(lǐng)域的經(jīng)典工具。

二、化學(xué)性質(zhì)與結(jié)構(gòu)

化學(xué)結(jié)構(gòu)

FITC包含熒光素基團(tuán)和異硫氰酸酯活性基團(tuán)。異硫氰酸酯基團(tuán)能與蛋白質(zhì)或其他生物分子上的游離氨基（如賴氨酸側(cè)鏈）共價(jià)結(jié)合。

分子量389.4 Da

分子式C21H11NO5S

溶解性

FITC易溶于有機(jī)溶劑如DMSO、DMF，微溶于水，通常需先溶于有機(jī)溶劑后稀釋于水或緩沖液中。

穩(wěn)定性

對(duì)光敏感，強(qiáng)光下易發(fā)生光漂白，建議避光保存和使用。

三、熒光性質(zhì)

性質(zhì) 參數(shù)

激發(fā)波長(zhǎng) 495 nm

發(fā)射波長(zhǎng) 520 nm

熒光顏色 綠色

熒光量子產(chǎn)率 約0.9

光穩(wěn)定性 良好，需避免強(qiáng)光直射

FITC的熒光信號(hào)明亮，適合多種熒光顯微鏡、流式細(xì)胞儀和熒光板檢測(cè)設(shè)備使用。

四、標(biāo)記原理與應(yīng)用

標(biāo)記原理

FITC的異硫氰酸酯基團(tuán)能與含有游離氨基的分子（蛋白質(zhì)、肽、多肽、胺類化合物）發(fā)生親核加成反應(yīng)，形成穩(wěn)定的硫代脲共價(jià)鍵。該反應(yīng)通常在堿性緩沖液（pH 8.0-9.0）中進(jìn)行，以促進(jìn)氨基的活性。

標(biāo)記流程簡(jiǎn)述

溶解FITC于適宜有機(jī)溶劑；

將待標(biāo)記的蛋白或分子溶解于堿性緩沖液中；

緩慢加入FITC溶液，溫和攪拌反應(yīng)一定時(shí)間（通常1-4小時(shí)）；

通過(guò)透析、凝膠過(guò)濾或?qū)游龇ㄈコ坞xFITC，獲得純凈標(biāo)記產(chǎn)物。

應(yīng)用范圍

免疫熒光染色：標(biāo)記體，實(shí)現(xiàn)特異性檢測(cè)細(xì)胞或組織中的目標(biāo)原；

細(xì)胞追蹤：標(biāo)記細(xì)胞或細(xì)胞組分，觀察細(xì)胞動(dòng)態(tài)、遷移和定位；

分子相互作用研究：標(biāo)記蛋白質(zhì)或核酸，分析結(jié)合動(dòng)力學(xué)；

熒光成像：活細(xì)胞成像、組織切片觀察、體內(nèi)成像等。

五、產(chǎn)品特點(diǎn)

1. 高效穩(wěn)定的熒光性能

FITC具有高熒光量子效率和明亮的綠色熒光，適合多種熒光檢測(cè)儀器。

2. 反應(yīng)特異性強(qiáng)

異硫氰酸酯基團(tuán)對(duì)游離氨基選擇性高，標(biāo)記效率高，結(jié)合穩(wěn)定。

3. 兼容多種生物分子

廣泛適用于蛋白質(zhì)、多肽、氨基修飾的多糖等生物大分子標(biāo)記。

4. 易于操作

標(biāo)記條件溫和，無(wú)需復(fù)雜催化劑，適合常規(guī)實(shí)驗(yàn)室操作。

六、使用方法與注意事項(xiàng)

1. 溶解與儲(chǔ)存

溶于DMSO或DMF制備高濃度儲(chǔ)備液，避免水中長(zhǎng)期存放以防水解；

儲(chǔ)存于-20℃避光密封，防止光降解。

2. 標(biāo)記反應(yīng)

反應(yīng)緩沖常用碳酸鹽緩沖液（pH 8.5-9.0）；

控制FITC與待標(biāo)記物摩爾比，避免過(guò)量導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性；

反應(yīng)時(shí)間1-4小時(shí)，室溫或4℃進(jìn)行。

3. 純化與檢測(cè)

反應(yīng)后需通過(guò)透析或柱層析去除未結(jié)合FITC；

標(biāo)記產(chǎn)物可通過(guò)紫外-可見光譜、熒光光譜及SDS-PAGE（結(jié)合熒光掃描）檢測(cè)。

4. 注意事項(xiàng)

避光操作，避免熒光淬滅；

反應(yīng)pH過(guò)高或FITC過(guò)量可能影響生物活性；

FITC在水溶液中穩(wěn)定性有限，建議新鮮配制使用。

七、安全性與環(huán)保

FITC有一定的光敏性和毒性，操作時(shí)應(yīng)避免吸入粉塵和皮膚接觸；

使用時(shí)佩戴手套、護(hù)目鏡，操作環(huán)境通風(fēng)良好；

廢棄物按化學(xué)品管理規(guī)范處理。

八、質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)

檢測(cè)項(xiàng)目 標(biāo)準(zhǔn)指標(biāo)

外觀 黃色至橙黃色結(jié)晶性粉末

純度 ≥95%

熒光特性 激發(fā)495 nm，發(fā)射520 nm

水分含量 ≤1%

熔點(diǎn) 240-244 ℃

九、包裝規(guī)格與儲(chǔ)存

規(guī)格 包裝形式 儲(chǔ)存條件

5 mg 玻璃瓶密封 -20℃避光保存

25 mg 玻璃瓶密封 -20℃避光保存

100 mg 玻璃瓶密封 -20℃避光保存

十、常見問題解答

Q1：FITC標(biāo)記是否會(huì)影響蛋白質(zhì)活性？

A：過(guò)量標(biāo)記可能導(dǎo)致蛋白質(zhì)構(gòu)象改變和活性降低，建議優(yōu)化FITC與蛋白比例。

Q2：如何延長(zhǎng)FITC標(biāo)記物的熒光穩(wěn)定性？

A：避光保存，使用淬滅劑，盡量避免高溫和強(qiáng)光暴露。

Q3：FITC適合標(biāo)記哪些分子？

A：主要標(biāo)記含有游離氨基的蛋白質(zhì)、多肽及氨基化修飾的多糖。

十一、總結(jié)

FITC（異硫氰酸熒光素）因其優(yōu)異的熒光性能和化學(xué)反應(yīng)活性，成為生命科學(xué)領(lǐng)域中經(jīng)典、廣泛應(yīng)用的熒光標(biāo)記試劑。無(wú)論是免疫熒光檢測(cè)、細(xì)胞追蹤還是分子相互作用研究，F(xiàn)ITC均能提供穩(wěn)定且高靈敏度的熒光信號(hào)，幫助科研人員獲得精準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和豐富的生物學(xué)信息。

西安齊岳生物專業(yè)提供各類熒光標(biāo)記產(chǎn)品及定制服務(wù)，覆蓋小分子藥物、蛋白質(zhì)、多肽、核酸等多種生物分子。我們采用FITC、Cy3、Cy5、Alexa Fluor等多種主流熒光染料，滿足科研和產(chǎn)業(yè)在分子成像、藥物追蹤、機(jī)制研究等領(lǐng)域的需求。

西安齊岳生物確保標(biāo)記分子高效、穩(wěn)定且保留生物活性。我們支持個(gè)性化定制，靈活設(shè)計(jì)標(biāo)記方案，快速響應(yīng)客戶需求。

廠家:西安齊岳生物科技有限公司

用途:科研

狀態(tài)：固體/粉末/溶液

產(chǎn)地:西安

溫馨提醒:僅供科研，不能用于人體實(shí)驗(yàn)!

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