FITC-透明質酸3k
FITC標記低分子透明質酸(HA,MW 3?kDa)——綠色熒光多糖用于細胞攝取與分布分析
一、產品簡介
FITC-透明質酸3k是一種將熒光素異硫氰酸酯(FITC)共價標記于低分子量透明質酸(分子量約3,000道爾頓)上的熒光標記多糖。透明質酸(HA)作為人體內重要的天然多糖,廣泛分布于結締組織、皮膚、關節液及眼睛等組織。低分子量HA由于其獨特的生物學功能和良好的生物相容性,在細胞信號傳導、藥物遞送及生物成像等領域發揮重要作用。通過FITC標記,使其具備綠色熒光性能,便于在細胞及體內的追蹤和定位研究。
二、透明質酸簡介
分子結構
透明質酸是由重復的二糖單元—β-D-葡萄糖醛酸和β-D-乙酰氨基葡萄糖通過β-1,3和β-1,4糖苷鍵連接而成的線性多糖。其分子量范圍廣泛,從幾千至數百萬Da,分子量大小直接影響其物理化學性質和生物學功能。
低分子量HA特點
3kDa的低分子量HA分子短小,能夠穿透細胞膜,促進細胞信號傳導,調節細胞行為,同時具備較快的代謝和生物降解速度。
生物學功能
促進細胞遷移和增殖
參與組織修復和再生
作為細胞表面受體(如CD44、RHAMM)的配體,調節細胞-基質相互作用
低分子HA在炎癥反應、腫瘤轉移及免疫調節中具有重要作用
三、FITC標記原理及制備
標記機理
FITC的異硫氰酸酯基團(–N=C=S)與透明質酸分子中經過活化的氨基或羧基(通常通過EDC/NHS化學偶聯)形成穩定的共價鍵,從而將熒光素共價結合在HA分子鏈上。
制備步驟
HA活化:使用EDC(1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺)與NHS(N-羥基琥珀酰亞胺)激活HA上的羧基,形成活性中間體;
FITC偶聯:將FITC溶解于適宜溶劑(如DMSO),緩慢加入活化HA溶液,反應于適溫避光條件下進行數小時;
純化處理:通過透析或超濾除去未反應的FITC及雜質,獲得純凈的FITC-HA3k;
凍干保存:后冷凍干燥制備凍干粉,便于長期儲存和使用。
標記度調控
通過調整FITC與HA的摩爾比、反應時間及pH值,實現不同標記度,滿足不同實驗需求。
四、理化性質
性質 說明
分子量 約3,000 Da
外觀 綠色熒光透明液體或凍干粉
熒光特性 激發波長495 nm,發射波長520 nm
溶解性 良好溶于水及生理緩沖液
穩定性 避光、4°C冷藏保存,熒光強度穩定
生物相容性 良好,低細胞毒性
標記度 根據需求調節,一般低于5%
五、產品特點
1. 低分子量優勢
低分子量(3kDa)使FITC-HA具有更好的穿透力和生物活性,適合細胞內信號研究和快速代謝過程跟蹤。
2. 明亮穩定的熒光性能
FITC賦予HA穩定且強烈的綠色熒光,便于熒光顯微鏡、流式細胞儀及體內成像應用。
3. 保留透明質酸生物學功能
溫和標記工藝確保HA分子結構和生物活性不受損,保持對細胞受體的高親和力。
4. 優良水溶性與生物相容性
高純度、無菌處理,適合細胞培養及體內實驗。
六、主要應用領域
1. 細胞攝取及受體結合研究
追蹤低分子HA在細胞內的攝取過程及代謝路徑;
研究HA與CD44等受體的結合動力學與調控機制。
2. 熒光成像與細胞標記
用于熒光顯微成像,觀察HA在細胞和組織中的分布與動態變化;
用于流式細胞術定量分析細胞攝取HA的效率。
3. 藥物遞送系統
低分子HA作為藥物載體的標記,追蹤其遞送和釋放過程,評估載體性能;
開發靶向納米載體,改善藥物療效。
4. 組織工程與再生醫學
監測HA基生物材料的降解與細胞相互作用,輔助組織修復研究。
七、使用方法與操作指南
1. 復溶與保存
凍干粉用無菌PBS或純水輕輕溶解,建議濃度0.1–5 mg/mL;
避光保存于4°C,避免凍融循環以保護熒光性能。
2. 實驗操作
細胞實驗建議避光孵育,濃度和時間根據細胞類型調整,通常30分鐘至1小時;
使用后充分洗滌以去除非結合的標記物,減少背景干擾。
3. 注意事項
標記度較高可能影響HA活性,建議優化使用濃度;
配置新鮮溶液,避免長時間光照導致熒光淬滅。
八、質量控制標準
檢測項目 標準指標
外觀 綠色透明液體或凍干粉
純度 ≥95%
熒光性能 激發495 nm,發射520 nm,信號穩定
分子量 約3,000 Da
生物活性 保持對CD44受體結合能力
毒性檢測 細胞存活率≥90%
九、包裝規格
規格 包裝形式 儲存條件
1 mg 凍干粉 4°C 避光保存
5 mg 凍干粉 4°C 避光保存
10 mg 凍干粉 4°C 避光保存
十、常見問題解答
Q1:FITC-HA3k的激發和發射波長是多少?
A:激發波長約495 nm,發射波長約520 nm,發出明亮綠色熒光。
Q2:低分子量HA與高分子量HA的區別?
A:低分子HA分子量小,易穿透細胞膜,活性更強,代謝快;高分子HA主要作用于細胞外基質,穩定性更強。
Q3:產品適合用于活細胞熒光成像嗎?
A:適合,低細胞毒性且熒光穩定,適合細胞內攝取和信號傳導研究。
十一、總結
FITC-透明質酸3k結合了低分子量HA的良好生物活性和FITC的高效熒光標記性能,是細胞生物學、藥物遞送和生物成像領域的理想工具。其優異的水溶性、低毒性和穩定的熒光信號,為研究HA相關生命過程及開發新型納米藥物載體提供了有力支持。
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廠家:西安齊岳生物科技有限公司
用途:科研
狀態:固體/粉末/溶液
產地:西安
溫馨提醒:僅供科研,不能用于人體實驗!
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