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FITC標記低分子透明質酸——綠色熒光多糖用于細胞攝取與分布分析
發布時間:2025-07-21     作者:ssl   分享到:

FITC-透明質酸3k

FITC標記低分子透明質酸(HA,MW 3?kDa)——綠色熒光多糖用于細胞攝取與分布分析

一、產品簡介

FITC-透明質酸3k是一種將熒光素異硫氰酸酯(FITC)共價標記于低分子量透明質酸(分子量約3,000道爾頓)上的熒光標記多糖。透明質酸(HA)作為人體內重要的天然多糖,廣泛分布于結締組織、皮膚、關節液及眼睛等組織。低分子量HA由于其獨特的生物學功能和良好的生物相容性,在細胞信號傳導、藥物遞送及生物成像等領域發揮重要作用。通過FITC標記,使其具備綠色熒光性能,便于在細胞及體內的追蹤和定位研究。

二、透明質酸簡介

分子結構

透明質酸是由重復的二糖單元—β-D-葡萄糖醛酸和β-D-乙酰氨基葡萄糖通過β-1,3和β-1,4糖苷鍵連接而成的線性多糖。其分子量范圍廣泛,從幾千至數百萬Da,分子量大小直接影響其物理化學性質和生物學功能。

低分子量HA特點

3kDa的低分子量HA分子短小,能夠穿透細胞膜,促進細胞信號傳導,調節細胞行為,同時具備較快的代謝和生物降解速度。

生物學功能

促進細胞遷移和增殖

參與組織修復和再生

作為細胞表面受體(如CD44、RHAMM)的配體,調節細胞-基質相互作用

低分子HA在炎癥反應、腫瘤轉移及免疫調節中具有重要作用

三、FITC標記原理及制備

標記機理

FITC的異硫氰酸酯基團(–N=C=S)與透明質酸分子中經過活化的氨基或羧基(通常通過EDC/NHS化學偶聯)形成穩定的共價鍵,從而將熒光素共價結合在HA分子鏈上。

制備步驟

HA活化:使用EDC(1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺)與NHS(N-羥基琥珀酰亞胺)激活HA上的羧基,形成活性中間體;

FITC偶聯:將FITC溶解于適宜溶劑(如DMSO),緩慢加入活化HA溶液,反應于適溫避光條件下進行數小時;

純化處理:通過透析或超濾除去未反應的FITC及雜質,獲得純凈的FITC-HA3k;

凍干保存:后冷凍干燥制備凍干粉,便于長期儲存和使用。

標記度調控

通過調整FITC與HA的摩爾比、反應時間及pH值,實現不同標記度,滿足不同實驗需求。

FITC標記低分子透明質酸

四、理化性質

性質 說明

分子量 約3,000 Da

外觀 綠色熒光透明液體或凍干粉

熒光特性 激發波長495 nm,發射波長520 nm

溶解性 良好溶于水及生理緩沖液

穩定性 避光、4°C冷藏保存,熒光強度穩定

生物相容性 良好,低細胞毒性

標記度 根據需求調節,一般低于5%

五、產品特點

1. 低分子量優勢

低分子量(3kDa)使FITC-HA具有更好的穿透力和生物活性,適合細胞內信號研究和快速代謝過程跟蹤。

2. 明亮穩定的熒光性能

FITC賦予HA穩定且強烈的綠色熒光,便于熒光顯微鏡、流式細胞儀及體內成像應用。

3. 保留透明質酸生物學功能

溫和標記工藝確保HA分子結構和生物活性不受損,保持對細胞受體的高親和力。

4. 優良水溶性與生物相容性

高純度、無菌處理,適合細胞培養及體內實驗。

六、主要應用領域

1. 細胞攝取及受體結合研究

追蹤低分子HA在細胞內的攝取過程及代謝路徑;

研究HA與CD44等受體的結合動力學與調控機制。

2. 熒光成像與細胞標記

用于熒光顯微成像,觀察HA在細胞和組織中的分布與動態變化;

用于流式細胞術定量分析細胞攝取HA的效率。

3. 藥物遞送系統

低分子HA作為藥物載體的標記,追蹤其遞送和釋放過程,評估載體性能;

開發靶向納米載體,改善藥物療效。

4. 組織工程與再生醫學

監測HA基生物材料的降解與細胞相互作用,輔助組織修復研究。

七、使用方法與操作指南

1. 復溶與保存

凍干粉用無菌PBS或純水輕輕溶解,建議濃度0.1–5 mg/mL;

避光保存于4°C,避免凍融循環以保護熒光性能。

2. 實驗操作

細胞實驗建議避光孵育,濃度和時間根據細胞類型調整,通常30分鐘至1小時;

使用后充分洗滌以去除非結合的標記物,減少背景干擾。

3. 注意事項

標記度較高可能影響HA活性,建議優化使用濃度;

配置新鮮溶液,避免長時間光照導致熒光淬滅。

八、質量控制標準

檢測項目 標準指標

外觀 綠色透明液體或凍干粉

純度 ≥95%

熒光性能 激發495 nm,發射520 nm,信號穩定

分子量 約3,000 Da

生物活性 保持對CD44受體結合能力

毒性檢測 細胞存活率≥90%

九、包裝規格

規格 包裝形式 儲存條件

1 mg 凍干粉 4°C 避光保存

5 mg 凍干粉 4°C 避光保存

10 mg 凍干粉 4°C 避光保存

十、常見問題解答

Q1:FITC-HA3k的激發和發射波長是多少?

A:激發波長約495 nm,發射波長約520 nm,發出明亮綠色熒光。

Q2:低分子量HA與高分子量HA的區別?

A:低分子HA分子量小,易穿透細胞膜,活性更強,代謝快;高分子HA主要作用于細胞外基質,穩定性更強。

Q3:產品適合用于活細胞熒光成像嗎?

A:適合,低細胞毒性且熒光穩定,適合細胞內攝取和信號傳導研究。

十一、總結

FITC-透明質酸3k結合了低分子量HA的良好生物活性和FITC的高效熒光標記性能,是細胞生物學、藥物遞送和生物成像領域的理想工具。其優異的水溶性、低毒性和穩定的熒光信號,為研究HA相關生命過程及開發新型納米藥物載體提供了有力支持。

西安齊岳生物專業提供各類熒光標記產品及定制服務,覆蓋小分子藥物、蛋白質、多肽、核酸等多種生物分子。我們采用FITC、Cy3、Cy5、Alexa Fluor等多種主流熒光染料,滿足科研和產業在分子成像、藥物追蹤、機制研究等領域的需求。

西安齊岳生物確保標記分子高效、穩定且保留生物活性。我們支持個性化定制,靈活設計標記方案,快速響應客戶需求。

廠家:西安齊岳生物科技有限公司

用途:科研

狀態:固體/粉末/溶液

產地:西安

溫馨提醒:僅供科研,不能用于人體實驗!

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