FITC-Transferrin
FITC-Transferrin(熒光素標記轉鐵蛋白)——細胞內吞與靶向傳輸示蹤探針
一、產品簡介
FITC-Transferrin是一種將轉鐵蛋白(Transferrin,Tf)通過熒光素異硫氰酸酯(FITC)共價標記制備而成的生物標記試劑。轉鐵蛋白是一種鐵離子結合蛋白,主要負責將鐵離子轉運到細胞內,參與細胞的鐵代謝和生理調控。通過FITC標記后,轉鐵蛋白獲得綠色熒光信號,能夠被廣泛用于細胞攝取研究、受體介導內吞、細胞表面受體定位和靶向藥物遞送等生物醫學領域的研究。
二、轉鐵蛋白(Transferrin)基礎知識
結構與功能:轉鐵蛋白是一種約80 kDa的糖蛋白,具有兩個鐵結合位點,可與Fe3?高親和力結合。轉鐵蛋白通過與細胞表面轉鐵蛋白受體(TfR)結合,介導鐵的攝取和轉運。
生物學意義:
參與鐵穩態調節,保證細胞對鐵的需求;
由于腫瘤細胞和快速增殖細胞通常高表達TfR,轉鐵蛋白成為靶向遞送的理想載體;
在藥物輸送、細胞標記及診斷成像中有廣泛應用。
三、FITC標記原理及制備
標記機理:FITC含有活性的異硫氰酸酯基團(–N=C=S),能與轉鐵蛋白中的賴氨酸殘基氨基(–NH?)形成穩定的共價硫脲鍵。
制備過程:
將轉鐵蛋白溶解在適宜pH緩沖液中(通常pH 8.0-9.0);
在緩沖液中緩慢加入FITC,反應一定時間以實現有效標記;
通過透析或凝膠過濾除去未結合的游離FITC,純化得到FITC-Transferrin;
標記效率:控制在保證蛋白活性的前提下,獲得適合實驗要求的熒光強度。
四、產品理化性質
性質 說明
分子量 約80 kDa
外觀 綠色透明液體或凍干粉
熒光激發/發射波長 激發約495 nm,發射約520 nm(綠色熒光)
溶解性 易溶于PBS、生理鹽水及常規緩沖液
穩定性 避光保存于4°C,熒光穩定性良好
生物活性 保持對轉鐵蛋白受體的高親和力
五、產品性能與特點
1. 保持高親和力受體結合特性
FITC標記過程中保證轉鐵蛋白三維結構及活性,標記后仍能有效與轉鐵蛋白受體結合,模擬自然受體介導的內吞過程。
2. 明亮、穩定的綠色熒光信號
FITC分子發射出明亮綠色熒光,便于使用熒光顯微鏡、流式細胞儀等多種檢測設備實現高靈敏度檢測。
3. 優異的生物相容性與低細胞毒性
適用于活細胞實驗,且對細胞無明顯毒副作用,適合多種細胞系和體外應用。
4. 多領域應用廣泛
涵蓋細胞生物學、藥物遞送、納米載體靶向、受體表達分析及生物醫學成像等。
六、主要應用
1. 細胞攝取及受體介導內吞研究
研究細胞攝取轉鐵蛋白的機制及動力學;
探索不同細胞類型中轉鐵蛋白受體表達水平及功能。
2. 受體靶向藥物及納米載體研究
作為靶向分子修飾納米粒子表面,實現在細胞中的高效遞送;
監測藥物載體的細胞攝取和分布。
3. 細胞標記及流式細胞分析
用于分析細胞表面轉鐵蛋白受體的表達和分布;
結合多重染色實現細胞表型鑒定和功能分析。
4. 熒光顯微成像
觀察轉鐵蛋白及其受體在細胞及組織中的定位;
輔助疾病機制的研究,如腫瘤、神經退行性疾病和鐵代謝異常。
七、使用方法與操作建議
1. 配制和保存
凍干粉或液體形式產品在使用前用PBS或相應緩沖液復溶;
建議濃度為0.1-1 mg/mL,根據實驗需求調整;
避光保存,4°C冷藏,避免反復凍融。
2. 實驗條件優化
推薦使用濃度范圍0.1-20 μg/mL,孵育時間30分鐘至1小時;
室溫或4°C孵育均可,視實驗設計靈活調整;
孵育后多次用緩沖液洗滌,減少非特異性結合。
3. 注意事項
避免熒光淬滅,實驗及存儲中應避免強光照射;
標記可能對蛋白部分活性產生影響,建議實驗前驗證結合能力;
流式細胞術實驗中設置陰性對照,保證數據準確。
八、質量控制
項目 標準指標
純度 ≥95%
熒光強度 激發495 nm,發射520 nm,信號穩定
受體結合活性 ≥90%保持天然轉鐵蛋白受體結合能力
分子完整性 SDS-PAGE檢測,確認無降解
細胞相容性 細胞存活率≥90%
九、包裝規格
規格 包裝形式 儲存條件
0.5 mg 凍干粉 –20°C 避光保存
1 mg 凍干粉 –20°C 避光保存
5 mg 凍干粉 –20°C 避光保存
十、常見問題
Q1:FITC-Transferrin的激發和發射波長是多少?
A:激發波長約495 nm,發射波長約520 nm,呈明亮綠色熒光。
Q2:該產品適合用于活細胞染色嗎?
A:是的,FITC-Transferrin適合活細胞攝取及受體研究,建議先測試細胞毒性。
Q3:如何防止熒光信號衰減?
A:避免強光照射,使用漂白劑,實驗及存儲時避光處理。
十一、總結
FITC-Transferrin結合了轉鐵蛋白天然的生物功能和FITC優異的熒光性能,是細胞生物學及藥物輸送領域的重要工具。其保持了轉鐵蛋白的高親和力和受體結合活性,能夠有效用于細胞攝取、受體定位及藥物靶向研究,助力生命科學研究和精準醫學發展。
西安齊岳生物專業提供各類熒光標記產品及定制服務,覆蓋小分子藥物、蛋白質、多肽、核酸等多種生物分子。我們采用FITC、Cy3、Cy5、Alexa Fluor等多種主流熒光染料,滿足科研和產業在分子成像、藥物追蹤、機制研究等領域的需求。
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廠家:西安齊岳生物科技有限公司
用途:科研
狀態:固體/粉末/溶液
產地:西安
溫馨提醒:僅供科研,不能用于人體實驗!
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