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FITC-Transferrin,熒光素標記轉鐵蛋白,——細胞內吞與靶向傳輸示蹤探針
發布時間:2025-07-21     作者:ssl   分享到:

FITC-Transferrin

FITC-Transferrin(熒光素標記轉鐵蛋白)——細胞內吞與靶向傳輸示蹤探針

一、產品簡介

FITC-Transferrin是一種將轉鐵蛋白(Transferrin,Tf)通過熒光素異硫氰酸酯(FITC)共價標記制備而成的生物標記試劑。轉鐵蛋白是一種鐵離子結合蛋白,主要負責將鐵離子轉運到細胞內,參與細胞的鐵代謝和生理調控。通過FITC標記后,轉鐵蛋白獲得綠色熒光信號,能夠被廣泛用于細胞攝取研究、受體介導內吞、細胞表面受體定位和靶向藥物遞送等生物醫學領域的研究。

二、轉鐵蛋白(Transferrin)基礎知識

結構與功能:轉鐵蛋白是一種約80 kDa的糖蛋白,具有兩個鐵結合位點,可與Fe3?高親和力結合。轉鐵蛋白通過與細胞表面轉鐵蛋白受體(TfR)結合,介導鐵的攝取和轉運。

生物學意義:

參與鐵穩態調節,保證細胞對鐵的需求;

由于腫瘤細胞和快速增殖細胞通常高表達TfR,轉鐵蛋白成為靶向遞送的理想載體;

在藥物輸送、細胞標記及診斷成像中有廣泛應用。

三、FITC標記原理及制備

標記機理:FITC含有活性的異硫氰酸酯基團(–N=C=S),能與轉鐵蛋白中的賴氨酸殘基氨基(–NH?)形成穩定的共價硫脲鍵。

制備過程:

將轉鐵蛋白溶解在適宜pH緩沖液中(通常pH 8.0-9.0);

在緩沖液中緩慢加入FITC,反應一定時間以實現有效標記;

通過透析或凝膠過濾除去未結合的游離FITC,純化得到FITC-Transferrin;

標記效率:控制在保證蛋白活性的前提下,獲得適合實驗要求的熒光強度。

四、產品理化性質

性質 說明

分子量 約80 kDa

外觀 綠色透明液體或凍干粉

熒光激發/發射波長 激發約495 nm,發射約520 nm(綠色熒光)

溶解性 易溶于PBS、生理鹽水及常規緩沖液

穩定性 避光保存于4°C,熒光穩定性良好

生物活性 保持對轉鐵蛋白受體的高親和力

FITC-Transferrin,熒光素標記轉鐵蛋白

五、產品性能與特點

1. 保持高親和力受體結合特性

FITC標記過程中保證轉鐵蛋白三維結構及活性,標記后仍能有效與轉鐵蛋白受體結合,模擬自然受體介導的內吞過程。

2. 明亮、穩定的綠色熒光信號

FITC分子發射出明亮綠色熒光,便于使用熒光顯微鏡、流式細胞儀等多種檢測設備實現高靈敏度檢測。

3. 優異的生物相容性與低細胞毒性

適用于活細胞實驗,且對細胞無明顯毒副作用,適合多種細胞系和體外應用。

4. 多領域應用廣泛

涵蓋細胞生物學、藥物遞送、納米載體靶向、受體表達分析及生物醫學成像等。

六、主要應用

1. 細胞攝取及受體介導內吞研究

研究細胞攝取轉鐵蛋白的機制及動力學;

探索不同細胞類型中轉鐵蛋白受體表達水平及功能。

2. 受體靶向藥物及納米載體研究

作為靶向分子修飾納米粒子表面,實現在細胞中的高效遞送;

監測藥物載體的細胞攝取和分布。

3. 細胞標記及流式細胞分析

用于分析細胞表面轉鐵蛋白受體的表達和分布;

結合多重染色實現細胞表型鑒定和功能分析。

4. 熒光顯微成像

觀察轉鐵蛋白及其受體在細胞及組織中的定位;

輔助疾病機制的研究,如腫瘤、神經退行性疾病和鐵代謝異常。

七、使用方法與操作建議

1. 配制和保存

凍干粉或液體形式產品在使用前用PBS或相應緩沖液復溶;

建議濃度為0.1-1 mg/mL,根據實驗需求調整;

避光保存,4°C冷藏,避免反復凍融。

2. 實驗條件優化

推薦使用濃度范圍0.1-20 μg/mL,孵育時間30分鐘至1小時;

室溫或4°C孵育均可,視實驗設計靈活調整;

孵育后多次用緩沖液洗滌,減少非特異性結合。

3. 注意事項

避免熒光淬滅,實驗及存儲中應避免強光照射;

標記可能對蛋白部分活性產生影響,建議實驗前驗證結合能力;

流式細胞術實驗中設置陰性對照,保證數據準確。

八、質量控制

項目 標準指標

純度 ≥95%

熒光強度 激發495 nm,發射520 nm,信號穩定

受體結合活性 ≥90%保持天然轉鐵蛋白受體結合能力

分子完整性 SDS-PAGE檢測,確認無降解

細胞相容性 細胞存活率≥90%

九、包裝規格

規格 包裝形式 儲存條件

0.5 mg 凍干粉 –20°C 避光保存

1 mg 凍干粉 –20°C 避光保存

5 mg 凍干粉 –20°C 避光保存

十、常見問題

Q1:FITC-Transferrin的激發和發射波長是多少?

A:激發波長約495 nm,發射波長約520 nm,呈明亮綠色熒光。

Q2:該產品適合用于活細胞染色嗎?

A:是的,FITC-Transferrin適合活細胞攝取及受體研究,建議先測試細胞毒性。

Q3:如何防止熒光信號衰減?

A:避免強光照射,使用漂白劑,實驗及存儲時避光處理。

十一、總結

FITC-Transferrin結合了轉鐵蛋白天然的生物功能和FITC優異的熒光性能,是細胞生物學及藥物輸送領域的重要工具。其保持了轉鐵蛋白的高親和力和受體結合活性,能夠有效用于細胞攝取、受體定位及藥物靶向研究,助力生命科學研究和精準醫學發展。

西安齊岳生物專業提供各類熒光標記產品及定制服務,覆蓋小分子藥物、蛋白質、多肽、核酸等多種生物分子。我們采用FITC、Cy3、Cy5、Alexa Fluor等多種主流熒光染料,滿足科研和產業在分子成像、藥物追蹤、機制研究等領域的需求。

西安齊岳生物確保標記分子高效、穩定且保留生物活性。我們支持個性化定制,靈活設計標記方案,快速響應客戶需求。

廠家:西安齊岳生物科技有限公司

用途:科研

狀態:固體/粉末/溶液

產地:西安

溫馨提醒:僅供科研,不能用于人體實驗!

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