FITC-LCA 綠色熒光標記小扁豆凝集素

FITC標記小扁豆凝集素（LCA）——綠色熒光糖鏈識別探針

一、產品簡介

FITC-LCA是將小扁豆凝集素（Lens culinaris agglutinin，LCA）通過共價結合方式標記上綠色熒光染料熒光素異硫氰酸酯（FITC）制備的熒光標記糖結合蛋白。LCA是一種來源于小扁豆的植物凝集素，具有對特定糖鏈結構尤其是富含巖藻糖和高甘露糖結構的高親和力，廣泛應用于糖蛋白的鑒定、細胞表面糖鏈研究及疾病相關糖修飾分析。通過FITC標記，LCA獲得了強烈且穩定的綠色熒光信號，適合用于熒光顯微鏡、流式細胞術及其他熒光檢測技術。

二、小扁豆凝集素（LCA）簡介

來源：提取自小扁豆（Lens culinaris）種子；

分子結構：LCA為四聚體蛋白，分子量約26–28 kDa（單體）；

糖結合特異性：優先識別含巖藻糖（Fucose）和高甘露糖的寡糖結構，特別是N-連接糖鏈中的核心巖藻糖；

生物功能：

介導細胞間識別和結合；

用于糖蛋白的特異性檢測；

在腫瘤細胞糖鏈變異研究中具有重要應用。

三、FITC標記原理與方法

FITC分子含有活性的異硫氰酸酯基團（–N=C=S），能與LCA蛋白的賴氨酸側鏈氨基（–NH?）共價結合，形成穩定的硫脲鍵；

標記過程溫和，避免蛋白質構象破壞，大限度保持LCA糖結合活性；

通過純化去除未結合的FITC，得到高純度的FITC-LCA產品。

四、產品理化性質

性質 說明

外觀 綠色熒光凍干粉或透明綠色液體

分子量 單體約26-28 kDa，四聚體約104-112 kDa

熒光特性 激發波長約495 nm，發射波長約520 nm（綠色熒光）

溶解性 良好溶于PBS、生理鹽水及緩沖液

穩定性 避光、低溫保存下熒光信號穩定

標記率（FITC/LCA） 通常為1-4 FITC分子/每個LCA四聚體

五、產品性能與特點

1. 高親和性和特異性結合

FITC-LCA保持了LCA對含巖藻糖及甘露糖的高親和性，能夠準確識別糖蛋白及細胞表面相關糖基結構。

2. 強烈且穩定的綠色熒光

FITC的綠色熒光信號明亮且漂白性好，方便通過熒光顯微鏡、流式細胞術等進行高靈敏度檢測。

3. 保持蛋白功能活性

標記條件溫和，大程度保護LCA蛋白的三維結構及糖結合功能，確保實驗可靠性。

4. 廣泛的適用性

可用于細胞糖蛋白定位、組織切片染色、流式細胞術分析及糖鏈修飾研究，滿足多樣化實驗需求。

六、主要應用領域

1. 細胞表面糖蛋白分析

利用FITC-LCA標記細胞表面的巖藻糖和高甘露糖糖基，分析細胞糖鏈表達狀態；

適用于腫瘤細胞及免疫細胞表型的糖基化研究。

2. 組織免疫熒光染色

在組織切片中定位含特定糖鏈的糖蛋白，研究組織病理學變化；

與其他體或熒光探針配合，實現多重標記。

3. 流式細胞術分析

對細胞群體進行定量檢測，分析細胞表面糖結構表達的異質性；

用于檢測細胞分化狀態和疾病相關糖修飾變化。

4. 糖蛋白純化與鑒定

結合LCA的糖結合特性，輔助篩選和純化含有特定糖基的糖蛋白。

5. 腫瘤及免疫研究

研究腫瘤細胞糖基化異常，揭示腫瘤發生發展機制；

探討免疫細胞表面糖結構對免疫功能的影響。

七、使用方法與建議

1. 配制與保存

凍干粉用PBS或適當緩沖液復溶，濃度一般為0.1–1 mg/mL，使用前充分混勻；

避光保存，4°C冷藏短期保存，凍干狀態可長期–20°C保存。

2. 實驗操作

標準染色濃度需根據細胞類型及實驗需求優化，常用濃度范圍為1–20 μg/mL；

染色時間一般為30分鐘至1小時，室溫或4°C孵育均可；

染色后需用緩沖液充分洗滌，減少非特異性結合。

3. 注意事項

避免強光照射，減少熒光淬滅；

標記可能對結合活性有輕微影響，建議對比未標記LCA進行活性驗證；

用于流式細胞術時，建議結合適當的陰性對照。

八、質量控制指標

檢測項目 標準指標

外觀 綠色凍干粉或透明液體

純度 ≥95%

熒光性能 激發495 nm，發射520 nm，熒光強烈穩定

糖結合活性 保持≥90%原LCA糖結合能力

分子量 SDS-PAGE確認四聚體結構完整

溶解性 良好，無明顯沉淀

九、包裝規格

規格 包裝形式 儲存條件

0.5 mg 凍干粉 –20°C 避光保存

1 mg 凍干粉 –20°C 避光保存

5 mg 凍干粉 –20°C 避光保存

十、常見問題解答

Q1：FITC-LCA的激發和發射波長是多少？

A：激發波長約495 nm，發射波長約520 nm，呈明亮綠色熒光。

Q2：能否用于活細胞染色？

A：FITC-LCA可以用于活細胞表面糖蛋白的標記，但需要注意濃度和孵育時間，避免影響細胞活力。

Q3：染色后如何避免熒光淬滅？

A：避免長時間光照，實驗過程中減少激光或強光源照射時間，使用漂白劑效果更佳。

十一、總結

FITC-LCA（綠色熒光標記小扁豆凝集素）結合了LCA高度特異的糖結合特性與FITC優異的綠色熒光性能，為細胞表面糖蛋白及糖鏈結構研究提供了強有力的工具。其穩定的熒光信號、優良的生物相容性和多樣的應用前景，使其在腫瘤學、免疫學及糖生物學領域被廣泛采用。

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廠家:西安齊岳生物科技有限公司

用途:科研

狀態：固體/粉末/溶液

產地:西安

溫馨提醒:僅供科研，不能用于人體實驗!

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