Ovalbumin-FITC
FITC修飾卵清蛋白用于免疫活性分析與原傳遞示蹤
一、產品概述
中文名稱:FITC標記卵白蛋白
英文名稱:Ovalbumin-FITC
別名:FITC-Ova、熒光素標記OVA
分子量:約45 kDa(天然卵白蛋白)
FITC標記度:通常在3~10 FITC分子/OVA分子之間,可定制
熒光激發/發射波長:495 nm / 519 nm(FITC特性)
外觀:黃色至綠色凍干粉末或溶液
純度:≥95%(SDS-PAGE)
溶解性:可溶于水、PBS、Tris緩沖液
儲存條件:-20°C 避光,避免反復凍融
用途級別:科研專用,不用于臨床診斷或治療
二、卵白蛋白與FITC標記原理
1. 卵白蛋白(Ovalbumin, OVA)
卵白蛋白是從雞蛋蛋白中提取的一種單鏈糖蛋白,是研究中常用的原模型蛋白,具有良好的免疫原性和生物活性。在免疫學研究、原遞呈實驗、樹突狀細胞功能研究、T細胞激活機制中被廣泛應用。
2. FITC(Fluorescein Isothiocyanate)
FITC是一種綠色熒光染料,帶有反應性異硫氰酸酯(–N=C=S)基團,可與蛋白質中的賴氨酸殘基上的氨基形成穩定的硫脲鍵,實現共價熒光標記。
3. Ovalbumin-FITC 的制備原理
在堿性緩沖條件(pH 8.5~9.0)下,將FITC與OVA反應;
反應后通過透析或凝膠過濾去除游離FITC;
純化后凍干或濃縮儲存。
三、理化性質
項目 參數
分子量 ~45 kDa(天然OVA)
熒光染料 FITC(Fluorescein)
激發峰 495 nm
發射峰 519 nm
溶解度 高度可溶于水性緩沖液
穩定性 冷凍避光條件下穩定12個月
四、應用方向
1. 原攝取與處理實驗
Ovalbumin 是研究樹突狀細胞、巨噬細胞、B細胞等 APC(原遞呈細胞) 對原的內吞、加工與遞呈機制的重要模型;
FITC標記可實現原的可視化追蹤和定量分析;
結合流式細胞術或熒光顯微鏡評估APC對原的攝取能力。
2. 免疫學研究
Ovalbumin-FITC 作為經典 MHC I/II 路徑原,廣泛用于研究T細胞激活、交叉遞呈(Cross-presentation);
可用于建立OVA模型小鼠(如 OT-I、OT-II 小鼠)中CD4?/CD8? T細胞激活實驗;
用于疫苗開發與遞送系統效率驗證。
3. 細胞內吞與轉運機制
FITC-Ova進入細胞后可用于觀察其在內體、溶酶體中的定位與分布;
可結合LysoTracker等染料進行共定位實驗;
評估胞吞活性和原釋放路徑。
4. 納米顆粒/藥物載體研究
將FITC-Ova負載于納米粒、脂質體、凝膠等載體中,研究其靶向性釋放與細胞攝取;
適用于藥物遞送系統可視化、定量釋放與胞內轉運研究。
5. 流式細胞術與成像分析
流式細胞儀(FACS)用于檢測原攝取效率;
共聚焦或激光掃描顯微鏡用于實時可視化分析;
結合DAPI、Cy5等染料進行多通道染色。
五、實驗操作建議
1. 溶解方法
建議使用無菌PBS或純水溶解至所需濃度;
溶液中可加入0.02% NaN?作防腐劑(如長期使用);
溶解后應分裝避光保存,避免反復凍融。
2. 推薦使用濃度
應用 建議濃度
細胞攝取實驗 10–100 μg/mL
流式分析 1–10 μg/mL
小鼠注射(免疫) 10–100 μg/只
納米載體負載實驗 可根據載體比調整
六、產品規格與定制服務
包裝規格 編號示例 備注
1 mg OVA-FITC-1 小規模實驗
5 mg OVA-FITC-5 多次重復實驗
10 mg OVA-FITC-10 大樣本使用
定制服務 可調標記度、凍干粉或液體、無菌無內毒素版本
支持以下定制:
高標記度(>10 FITC/OVA);
與Cy5、Rhodamine、AF488等熒光染料替換;
降低自發熒光背景版本;
與納米粒/膠束共修飾服務。
七、質控標準(QC)
檢測項目 方法 標準
純度 SDS-PAGE、UV ≥95%
FITC標記度 UV法(495/280 nm) 3–10 mol FITC/mol OVA
自由FITC含量 HPLC 不可檢出或微量
溶解度 觀察 完全溶于PBS
熒光穩定性 光照試驗 ≥90%保留率(7天)
八、儲存與有效期
狀態 儲存條件 有效期
凍干粉末 -20°C 避光 12個月
水溶液 4°C 避光,避免污染 建議7天內使用
冷凍分裝 -80°C可長期保存 ≥12個月
注意事項:
FITC容易光漂白,請避光操作;
避免反復凍融,建議分裝使用;
開瓶后盡量在2周內使用完畢。
九、常見問題(FAQ)
Q1:Ovalbumin-FITC 是否適用于體內成像?
A:FITC在體內成像穿透性有限(主要限于淺層組織或透明結構),如需深層成像,建議使用近紅外染料(如Cy7標記OVA)。
Q2:是否適用于CD4?/CD8? T細胞激活實驗?
A:是,OVA-FITC 可用于加載到DC細胞,激活來自OT-I/OT-II小鼠的T細胞(分別識別OVA257-264和OVA323-339)。
Q3:能否用于疫苗遞送載體的示蹤?
A:完全可以,FITC-Ova廣泛用于構建可視化疫苗遞送系統和原釋放實驗。
十、總結
Ovalbumin-FITC 是一款經典的免疫學研究工具蛋白,結合卵白蛋白的原性和FITC的可視化特性,成為研究原攝取、細胞內轉運、T細胞激活以及納米載體遞送等方向的理想工具。
產品經過嚴格純化、標記度控制與質控檢測,適配多種實驗平臺,如流式細胞術、共聚焦顯微成像、細胞實驗與小鼠動物模型。可根據不同實驗需求定制不同染料、標記度或載體組合。
西安齊岳生物專業提供各類熒光標記產品及定制服務,覆蓋小分子藥物、蛋白質、多肽、核酸等多種生物分子。我們采用FITC、Cy3、Cy5、Alexa Fluor等多種主流熒光染料,滿足科研和產業在分子成像、藥物追蹤、機制研究等領域的需求。
西安齊岳生物確保標記分子高效、穩定且保留生物活性。我們支持個性化定制,靈活設計標記方案,快速響應客戶需求。
廠家:西安齊岳生物科技有限公司
用途:科研
狀態:固體/粉末/溶液
產地:西安
溫馨提醒:僅供科研,不能用于人體實驗!
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