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Ovalbumin-FITC,FITC修飾卵清蛋白用于免疫活性分析與原傳遞示蹤
發布時間:2025-07-18     作者:ssl   分享到:

Ovalbumin-FITC

FITC修飾卵清蛋白用于免疫活性分析與原傳遞示蹤

一、產品概述

中文名稱:FITC標記卵白蛋白

英文名稱:Ovalbumin-FITC

別名:FITC-Ova、熒光素標記OVA

分子量:約45 kDa(天然卵白蛋白)

FITC標記度:通常在3~10 FITC分子/OVA分子之間,可定制

熒光激發/發射波長:495 nm / 519 nm(FITC特性)

外觀:黃色至綠色凍干粉末或溶液

純度:≥95%(SDS-PAGE)

溶解性:可溶于水、PBS、Tris緩沖液

儲存條件:-20°C 避光,避免反復凍融

用途級別:科研專用,不用于臨床診斷或治療

二、卵白蛋白與FITC標記原理

1. 卵白蛋白(Ovalbumin, OVA)

卵白蛋白是從雞蛋蛋白中提取的一種單鏈糖蛋白,是研究中常用的原模型蛋白,具有良好的免疫原性和生物活性。在免疫學研究、原遞呈實驗、樹突狀細胞功能研究、T細胞激活機制中被廣泛應用。

2. FITC(Fluorescein Isothiocyanate)

FITC是一種綠色熒光染料,帶有反應性異硫氰酸酯(–N=C=S)基團,可與蛋白質中的賴氨酸殘基上的氨基形成穩定的硫脲鍵,實現共價熒光標記。

3. Ovalbumin-FITC 的制備原理

在堿性緩沖條件(pH 8.5~9.0)下,將FITC與OVA反應;

反應后通過透析或凝膠過濾去除游離FITC;

純化后凍干或濃縮儲存。

三、理化性質

項目 參數

分子量 ~45 kDa(天然OVA)

熒光染料 FITC(Fluorescein)

激發峰 495 nm

發射峰 519 nm

溶解度 高度可溶于水性緩沖液

穩定性 冷凍避光條件下穩定12個月

四、應用方向

1. 原攝取與處理實驗

Ovalbumin 是研究樹突狀細胞、巨噬細胞、B細胞等 APC(原遞呈細胞) 對原的內吞、加工與遞呈機制的重要模型;

FITC標記可實現原的可視化追蹤和定量分析;

結合流式細胞術或熒光顯微鏡評估APC對原的攝取能力。

2. 免疫學研究

Ovalbumin-FITC 作為經典 MHC I/II 路徑原,廣泛用于研究T細胞激活、交叉遞呈(Cross-presentation);

可用于建立OVA模型小鼠(如 OT-I、OT-II 小鼠)中CD4?/CD8? T細胞激活實驗;

用于疫苗開發與遞送系統效率驗證。

3. 細胞內吞與轉運機制

FITC-Ova進入細胞后可用于觀察其在內體、溶酶體中的定位與分布;

可結合LysoTracker等染料進行共定位實驗;

評估胞吞活性和原釋放路徑。

4. 納米顆粒/藥物載體研究

將FITC-Ova負載于納米粒、脂質體、凝膠等載體中,研究其靶向性釋放與細胞攝取;

適用于藥物遞送系統可視化、定量釋放與胞內轉運研究。

5. 流式細胞術與成像分析

流式細胞儀(FACS)用于檢測原攝取效率;

共聚焦或激光掃描顯微鏡用于實時可視化分析;

結合DAPI、Cy5等染料進行多通道染色。

Ovalbumin-FITC,FITC修飾卵清蛋白

五、實驗操作建議

1. 溶解方法

建議使用無菌PBS或純水溶解至所需濃度;

溶液中可加入0.02% NaN?作防腐劑(如長期使用);

溶解后應分裝避光保存,避免反復凍融。

2. 推薦使用濃度

應用 建議濃度

細胞攝取實驗 10–100 μg/mL

流式分析 1–10 μg/mL

小鼠注射(免疫) 10–100 μg/只

納米載體負載實驗 可根據載體比調整

六、產品規格與定制服務

包裝規格 編號示例 備注

1 mg OVA-FITC-1 小規模實驗

5 mg OVA-FITC-5 多次重復實驗

10 mg OVA-FITC-10 大樣本使用

定制服務 可調標記度、凍干粉或液體、無菌無內毒素版本

支持以下定制:

高標記度(>10 FITC/OVA);

與Cy5、Rhodamine、AF488等熒光染料替換;

降低自發熒光背景版本;

與納米粒/膠束共修飾服務。

七、質控標準(QC)

檢測項目 方法 標準

純度 SDS-PAGE、UV ≥95%

FITC標記度 UV法(495/280 nm) 3–10 mol FITC/mol OVA

自由FITC含量 HPLC 不可檢出或微量

溶解度 觀察 完全溶于PBS

熒光穩定性 光照試驗 ≥90%保留率(7天)

八、儲存與有效期

狀態 儲存條件 有效期

凍干粉末 -20°C 避光 12個月

水溶液 4°C 避光,避免污染 建議7天內使用

冷凍分裝 -80°C可長期保存 ≥12個月

注意事項:

FITC容易光漂白,請避光操作;

避免反復凍融,建議分裝使用;

開瓶后盡量在2周內使用完畢。

九、常見問題(FAQ)

Q1:Ovalbumin-FITC 是否適用于體內成像?

A:FITC在體內成像穿透性有限(主要限于淺層組織或透明結構),如需深層成像,建議使用近紅外染料(如Cy7標記OVA)。

Q2:是否適用于CD4?/CD8? T細胞激活實驗?

A:是,OVA-FITC 可用于加載到DC細胞,激活來自OT-I/OT-II小鼠的T細胞(分別識別OVA257-264和OVA323-339)。

Q3:能否用于疫苗遞送載體的示蹤?

A:完全可以,FITC-Ova廣泛用于構建可視化疫苗遞送系統和原釋放實驗。

十、總結

Ovalbumin-FITC 是一款經典的免疫學研究工具蛋白,結合卵白蛋白的原性和FITC的可視化特性,成為研究原攝取、細胞內轉運、T細胞激活以及納米載體遞送等方向的理想工具。

產品經過嚴格純化、標記度控制與質控檢測,適配多種實驗平臺,如流式細胞術、共聚焦顯微成像、細胞實驗與小鼠動物模型。可根據不同實驗需求定制不同染料、標記度或載體組合。

西安齊岳生物專業提供各類熒光標記產品及定制服務,覆蓋小分子藥物、蛋白質、多肽、核酸等多種生物分子。我們采用FITC、Cy3、Cy5、Alexa Fluor等多種主流熒光染料,滿足科研和產業在分子成像、藥物追蹤、機制研究等領域的需求。

西安齊岳生物確保標記分子高效、穩定且保留生物活性。我們支持個性化定制,靈活設計標記方案,快速響應客戶需求。

廠家:西安齊岳生物科技有限公司

用途:科研

狀態:固體/粉末/溶液

產地:西安

溫馨提醒:僅供科研,不能用于人體實驗!

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