中文名:Atto 425-N-羥基琥珀酰亞胺酯
類別:熒光染料活性酯
分子特征:Atto 425是一種藍光激發的熒光染料,帶有NHS(N-hydroxysuccinimide)活性酯,可與胺基(如蛋白質、抗體、肽鏈中的賴氨酸殘基)發生共價結合。
化學性質
Atto 425 NHS Ester 結構中含有NHS活性酯基團,能在溫和條件下特異性地與初級胺反應,形成穩定的酰胺鍵。這種化學修飾方式廣泛用于標記蛋白質、多肽和其他含氨基的生物分子。
Atto 425染料具有高量子產率、優良的光穩定性和亮度,適用于多種熒光檢測技術。
應用范圍
蛋白質和抗體標記:通過NHS酯與蛋白質賴氨酸殘基的胺基共價結合,制備熒光標記抗體。
細胞成像:標記細胞表面蛋白或細胞內蛋白,進行熒光顯微鏡觀察。
流式細胞術:用作熒光探針,分析細胞群體。
免疫熒光分析:提高檢測靈敏度和信號特異性。
分子相互作用研究:作為示蹤劑用于結合動力學和空間分布研究。
五、使用注意事項
該試劑對水分敏感,保存應避光、干燥,低溫冷藏。
標記反應需在堿性緩沖液(pH約7.5-8.5)中進行,以保證胺基的活性。
標記完成后,需及時去除未反應的游離染料,以減少背景信號。
在活細胞標記時應注意細胞毒性和染料濃度的優化。
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