文獻：剪切流誘導的表面固定化脂質體的納米管化

鏈接：https://pubs.rsc.org/en/content/articlehtml/2012/ra/c2ra00629d

作者：Yurina Sekine ab、 Keita Abe a、 Akitaka Shimizu a、 Yoshihiro Sasaki ? * ac、 Shin-ichi Sawada d和 Kazunari Akiyoshi 

節選：

流體流動由一個封閉的通道腔室（μ-Slides VI，ibidi GmbH，德國慕尼黑）產生，該腔室可以避免彎月面和干燥效應，從而在腔室流道的較大區域內施加均勻的層流剪切流。該流道（親水性；長 17 mm；寬 3.8 mm；高 0.4 mm）位于兩個儲液器之間，儲液器通過魯爾接頭和硅膠管連接到計算機控制的注射泵（REGATO 100，KD Scientific，美國馬薩諸塞州霍利斯頓）（圖 1a ）。巨型脂質體通過親和素-生物素相互作用固定在該腔室內（圖 1b），基本與文獻所述一致。12簡而言之，將流道裝滿白蛋白牛生物素酰胺己酰 (BSA-生物素) 溶液 (2 mg mL ?1溶于HEPES 緩沖液中，10 mM，pH 7.4)，孵育 10 分鐘，然后用HEPES 緩沖液沖洗，得到生物素包被的通道。此過程重復兩次，直至腔室表面完全被生物素-BSA 覆蓋，如前所述。13然后將溶于HEPES 緩沖液的鏈霉親和素 (II 型，1 mg mL ?1 )添加到生物素包被的通道中，并在 40 分鐘內吸附。*后，用HEPES 緩沖液沖洗通道兩次。將由不同摩爾比的1,2-二油酰-sn-甘油-3-磷酸膽堿 (DOPC) 和生物素修飾的磷脂(1,2-二硬脂酰-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N- [生物素基（聚乙二醇）-2000]，DSPE-生物素) 組成的巨型脂質體引入流道，靜置 10 分鐘，使脂質體固定在通道內壁上。通過在果糖溶液14中溫和水化脂質薄膜來制備巨型脂質體，并用少量 (0.5 mol%) 熒光脂質探針標記脂質體的雙層，用于熒光顯微鏡檢查(配備 DP70 彩色CCD 相機的Olympus IX71落射熒光顯微鏡，日本 Olympus)。

當剪切流（300 μL min ?1 ，持續 2 分鐘）施加到固定含有 1 mol% DSPE-生物素的脂質體的通道時，熒光顯微鏡圖像（圖 2a ）清楚地顯示了管狀結構，而觀察到一些熒光團斑點，表明脂質體沒有納米管形成。該流速相當于 5 μN cm ?2的剪切應力。在當前條件下，至少 40% 的脂質體（基于脂質體的數量）形成了納米管。顯微圖像的熒光強度分析顯示，直徑小于 500 nm，分布范圍為 17%，但由于熒光顯微鏡的光學限制，很難從顯微圖像中確定納米管的確切直徑。在大多數情況下，納米管的延伸（下游）末端與其他脂質體相連，如圖 2a所示。在相同的流動條件下，不含 DSPE-生物素的脂質體被從流道中沖走（數據未顯示）。另一方面，當包埋有相對高濃度 DSPE-生物素（4 mol%）的巨型脂質體被固定并受到相同的剪切流時，脂質體結構保持在通道壁上（圖 2b）。該結果表明脂質體的強結合抑制了管化。為了評估管化方向，在 5 到 10 個視圖中記錄了納米管軸和流動方向之間的角度（θ ），并每 1°繪制納米管數量（n ）對θ的圖（圖 2c）。在管化方向上發現了強烈的偏差，表明納米管的形成方向與流體流動方向平行。

西安齊岳生物提供相關產品：

DSPE-PEG-LyP-1(CGNKRTRGC)（二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-*靶向蛋白)

mPEG-DLPE

DODMA

DSPE-PEG-Alkyne

MPG-PEG-DSPE

DOTMA

DOPE-PEI

DSPE-PEG-TAT

DSPE-PEG-APRPG(二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-*新生血管靶向肽)

以上文章內容來源各類期刊或文獻，如有侵權請聯系我們刪除！