CY7-SA(鏈霉親和素)偶聯物制備方法
中文名稱:CY7標記鏈霉親和素
英文名稱:Cy7-Streptavidin Conjugate
別名:Cy7-SA偶聯物、近紅外染料標記鏈霉親和素、賽妥染料標記鏈霉親和素
供應商:西安齊岳生物科技有限公司
用途:科研
一、原料與基本原理:
鏈霉親和素(Streptavidin, SA):一種四聚體蛋白,具有很強的與生物素結合能力,是常用的生物素化檢測系統核心分子;
Cy7-NHS(活性酯型近紅外熒光染料):N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)酯形式的Cy7能高效與蛋白質中的賴氨酸殘基反應,形成穩定的酰胺鍵;
緩沖液:如PBS(pH 7.4)或0.1M碳酸鹽緩沖液(pH 8.3)可提供穩定環境。
二、合成步驟:
材料準備
將SA蛋白溶于PBS緩沖液中,濃度一般控制在1–2 mg/mL;
共軛反應
按摩爾比約1:5~1:10(SA : Cy7-NHS)緩慢將染料溶液滴加至蛋白溶液中;
純化處理
反應結束后,使用透析袋(10 kDa)透析去除未結合染料;
質量控制與儲存
測定蛋白濃度(280 nm)和熒光吸收峰(Cy7:約750 nm)確認偶聯效率;
Cy7-NHS染料通常以DMSO為溶劑溶解,濃度約為1–10 mM備用。
反應體系在避光條件下,于室溫孵育0.5–2小時,輕輕攪拌促進反應;
為防止非特異性反應,pH維持在7.5–8.5,避免高溫或極端pH。
或使用凝膠過濾層析(如Sephadex G-25)進行純化,收集熒光峰對應的蛋白組分。
最終產物避光分裝于pH 7.4 PBS中,-20°C避光保存。
三、應用與優勢:
應用:常用于近紅外熒光成像、生物素標記分子檢測、免疫組化、電泳顯色、蛋白質追蹤和體內熒光成像等;
優勢:
發射波長約775 nm,組織穿透力強;
與生物素高親和結合,特異性強;
可與熒光素、Cy3等染料搭配用于多重檢測。
關于我們:
西安齊岳生物提供的熒光標記服務支持糖化學、蛋白質、多肽、抗體、核酸及納米材料等多種生物分子的熒光化修飾。可提供多種熒光探針(如FITC、Cy3、Cy5、Alexa Fluor系列、ICG等),根據應用場景(流式細胞、共聚焦、活體成像等)選擇合適波長及標記方式。服務包含標記反應、純化、標記率評估及質量驗證,確保分子活性和信號強度。適用于細胞追蹤、分子成像、靶向驗證等研究,亦可提供定制熒光強度、pH響應或近紅外探針功能化服務。
以上資料由小編zhn提供,僅用于科研
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