cy5.5熒光染料的激發和發射波長是多少?
Cy5.5 是一種常用的 近紅外熒光染料(Near-Infrared Fluorescent Dye),屬于 Cyanine(菁染料)系列,其波長比Cy5更長,具有更深的組織穿透能力和更低的背景信號,非常適合用于 體內成像(in vivo imaging) 和 遠紅外熒光標記 等應用。
基本信息
名稱:Cy5.5(Cyanine5.5)
激發波長(Excitation):約 675 nm
發射波長(Emission):約 694–710 nm(具體取決于環境)
熒光顏色:近紅外(NIR),肉眼不可見,儀器可檢測
溶解性:水溶性或有機溶劑溶解性取決于官能團修飾(如 NHS ester、maleimide 等)
主要應用
體內熒光成像(In Vivo Imaging)
由于其近紅外特性,Cy5.5信號能在動物體內穿透深層組織,常用于小鼠成像、腫瘤靶向追蹤、藥物釋放監測等。
免疫標記 / 抗體偶聯
Cy5.5 可通過 NHS 酯、馬來酰亞胺等官能團與蛋白質、抗體、肽偶聯,用于熒光標記或靶向檢測。
熒光探針開發
被廣泛用于構建熒光分子探針、FRET體系和納米探針等。
DNA/RNA 探針標記
可與寡核苷酸結合,用于雜交實驗、miRNA檢測、熒光原位雜交(FISH)等。
生物傳感器與藥物遞送系統成像
標記于納米材料或載體(如脂質體、聚合物、蛋白等)用于追蹤、釋放動力學研究。
? 優點
低背景干擾:在NIR區間熒光干擾小,組織自身熒光弱。
組織穿透能力強:適合活體動物成像。
靈敏度高:發光強度高,適合微量靶標檢測。
兼容FRET系統:可用作FRET供體或受體(與Cy7或其他遠紅外染料搭配)。
注意事項
光敏性強:需避光保存,通常存于 -20°C 干燥環境。
化學穩定性一般:特別是NHS酯類活性基團,易水解,需現配現用。
標記密度控制:蛋白或抗體標記時需控制熒光/蛋白比例,避免熒光淬滅或功能干擾。
?? 常見Cy5.5衍生物(供偶聯使用)
衍生物形式 | 功能用途 |
Cy5.5-NHS | 與氨基反應,常用于蛋白/抗體標記 |
Cy5.5-maleimide | 與巰基反應,用于標記含半胱氨酸的分子 |
Cy5.5-azide | Click化學反應用 |
Cy5.5-hydrazide | 與醛/酮基反應,適合糖基或醛標記系統 |
與其他近紅外染料比較(如 Cy7、Alexa Fluor 750)
染料 | 激發波長 | 發射波長 | 特點 |
Cy5.5 | ~675 nm | ~694–710 nm | 明亮、穿透力適中 |
Cy7 | ~743 nm | ~767 nm | 更長波長,穿透力更強,但信號略弱 |
AF750 | ~749 nm | ~775 nm | 商用性能強,穩定性好 |
總結
Cy5.5 是一種高靈敏、低背景、適用于近紅外區域的熒光染料,特別適用于體內成像和遠紅外標記。它在抗體標記、探針設計和納米藥物可視化中具有廣泛用途。