熒光素-聚乙二醇-生物素 FITC-PEG-BIOTIN對細胞表面的修飾作用的文獻分享
FITC-BIOTIN 是由異硫氰酸熒光素(FITC)和生物素通過共價鍵連接而成的熒光探針。該分子保留了生物素對親和素/鏈霉親和素的高親和力,同時具有 FITC 的典型熒光特性(激發波長約495 nm,發射約519 nm)。FITC-BIOTIN 常用于免疫熒光、細胞成像、親和標記、ELISA 檢測及微陣列技術中。其結構穩定,水溶性良好,既具靶向識別能力又具熒光示蹤功能,是分子探針和納米載體修飾的優選標記分子。
FITC-PEG-BIOTIN(熒光素-聚乙二醇-生物素)
FITC-PEG-BIOTIN 是一種三功能連接分子,由熒光素(FITC)、聚乙二醇(PEG)和生物素三部分組成。FITC 具備綠色熒光示蹤功能(Ex/Em:495/519 nm),PEG 提供分子柔性和親水性,可增強溶解性與穩定性,而生物素能特異性結合親和素或鏈霉親和素。此構造常用于構建熒光標記的靶向系統、生物成像、納米載體修飾和親和捕獲等研究。適合在細胞實驗、診斷檢測或蛋白探針標記中使用,兼具識別與成像雙重功能。
中文名稱:熒光素標記聚乙二醇-生物素
英文名稱:FITC-PEG-Biotin
別名:熒光生物素-PEG、FITC-PEG?-Biotin、FITC-PEGylated Biotin
CAS號:無固定CAS(為定制連接分子)
結構類型:FITC—PEG—Biotin(三元功能分子)
應用說明:
1. 免疫分析:FITC-PEG-Biotin可與特異性抗體結合,用于免疫分析,如酶聯免疫吸附實驗(ELISA)、免疫印跡(Western blot)等。通過將FITC-PEG-Biotin標記的抗體與目標分子結合,可以實現對特定蛋白質或分子的定性和定量檢測。
2. 免疫組織化學:FITC-PEG-Biotin可以用于免疫組織化學和免疫染色。將FITC-PEG-Biotin結合到抗體上,可以實現對組織樣本中特定抗原的熒光染色。這種方法常用于研究組織中蛋白質的定位和表達情況。
3. 熒光顯微鏡成像:FITC-PEG-Biotin的熒光特性使其在熒光顯微鏡成像中具有應用。通過將FITC-PEG-Biotin與目標分子結合,可以實現對細胞或組織中特定結構或分子的可視化和定位。這種方法常用于細胞定位研究和細胞內分子相互作用的觀察。
4. 熒光流式細胞術:FITC-PEG-Biotin可用于熒光流式細胞術中的細胞表面標記和檢測。將FITC-PEG-Biotin結合到特定抗體上,可以用于檢測細胞表面蛋白質的表達水平、細胞類型的鑒定和細胞亞群的分析等。
5. 藥物傳遞研究:FITC-PEG-Biotin可作為藥物載體或納米粒子的表面標記。通過將FITC-PEG-Biotin結合到藥物或納米粒子上,可以實現對其在體內的分布、代謝和靶向傳遞等方面的研究。
在使用FITC-PEG-Biotin進行生物標志物檢測和分析時,需要注意實驗設計、控制反應條件和選擇適當的檢測方法。合理選擇濃度和使用條件,以確保實驗結果的準確性和可靠性。
參考文獻:
來源:
https://link.springer.com/article/10.1186/s13287-023-03446-w
作者:
Yukiya Takayama, Kosuke Kusamori, Yuri Katsurada, Shu Obana, Shoko Itakura & Makiya Nishikawa
標題
表面聚乙二醇化高效遞送間充質干細胞/基質細胞至受損肝臟
結論:
聚乙二醇修飾骨髓間充質干細胞表面
為了評估PEG對細胞表面的修飾作用,我們選擇了FITC或Alexa488標記的PEG-生物素。FITC-PEG修飾的C3H10T1/2(FITC-PEG-C3H10T1/2)中FITC的熒光強度顯著高于FITC-PEG-生物素處理的未修飾C3H10T1/1(FITC-PEG生物素?+?C3H10T1/2)(圖1A)。此外,共聚焦顯微圖像顯示,FITC熒光信號定位在C3H10T1/2細胞的表面(圖1B)。這些結果表明,使用ABC法用FITC-PEG-生物素成功修飾了C3H10T1/2細胞的表面。使用Alexa488 PEG-生物素評估PEG修飾的保留時間(圖1C,附加文件1:圖S1)。Alexa488-PEG的熒光強度在24小時內逐漸降低。孵育120小時后,其熒光強度仍保持在初始值的50%。盡管在隨后的時間點在C3H10T1/2細胞內檢測到某些熒光信號,但即使在第5天,這些信號仍留在細胞表面。此外,還評估了PEG修飾對C3H10T1/2細胞特性的影響。PEG修飾對C3H10T1/2細胞的存活率、增殖和分化的影響可以忽略不計(圖2)。
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