蛋白酶

蛋白酶是蛋白水解酶的簡稱,是一類肽鏈內切酶，只能切開肽鏈內部的鍵,而不能切開肽鏈末端的鍵,因此也叫做內肽酶。常用的蛋白酶主要有胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶(糜蛋白酶)、嗜熱菌蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、葡萄球菌蛋白酶和梭菌蛋白酶等。不同的蛋白酶作用于肽鏈的位點不同。

1.胰蛋白酶這是常用的蛋白水解酶,專一性強,只斷裂賴氨酸或精氨酸殘基的羧基端參與形成的肽鍵。因此,用它斷裂多肽鏈得到的是以賴氨酸和精氨酸為C-末端殘基的肽段。

2.胰凝乳蛋白酶此酶的專一性不如胰蛋白酶,它斷裂苯丙氨酸﹑酪氨酸和色氨酸等疏水氨基酸殘基的羧基端肽鍵。

3.胃蛋白酶它的專一性與胰凝乳蛋白酶類似,但它要求斷裂點兩側的殘基都是疏水性氨基酸,如苯丙氨酸-苯丙氨酸。此外,胃蛋白酶與胰凝乳蛋白酶的適宜pH不同,前者是pH2;后者是pH8~9。

4.木瓜蛋白酶木瓜蛋白酶的專-性差,斷裂位點與其附近的序列關系密切,它對精氨酸和賴氨酸殘基的羧基端肽鍵敏感。

5.葡萄球菌蛋白酶葡萄球菌蛋白酶亦稱谷氨酸蛋白酶,是從金黃色葡萄球菌菌株Vs中分離得到的。當在磷酸緩沖液( pH7.8)中進行裂解時,它能在谷氨酸殘基和天冬氨酸殘基的羧基端斷裂肽鍵。如果改用碳酸氫銨緩沖液( pH7.8)或醋酸緩沖液( pH4.0)時,則只能斷裂谷氨酸殘基羧基端的肽鍵。

6.梭菌蛋白酶梭菌蛋白酶亦稱為精氨酸蛋白酶，是從梭狀芽孢桿菌中分離出來的。該酶專門裂解精氨酸殘基的羧基端肽鍵。

肽酶

能夠水解蛋白質的酶除了上述蛋白水解酶以外，還有一類叫做肽酶的水解酶,這是一類肽鏈外切酶,或叫做外肽酶。外肽酶分為兩類:一類是從肽鏈的N 一末端逐個地切下氨基酸,叫做氨肽酶;另一類是專一地從肽鏈的C-末端開始逐個降解,釋放出游離氨基酸，叫做羧肽酶。由此可見,肽酶的作用是將蛋白質的肽鏈徹底水解為氨基酸。

1.氨肽酶﹐常用的氨肽酶是亮氨酸氨肽酶,亮氨酸氨肽酶不是只能水解以亮氨酸為N-末端殘基的肽鍵,只是水解以亮氨酸為N-末端的肽鍵速度大。此外,還有焦谷氨酸氨肽酶等。

2.羧肽酶惇目前常用的有四種羧肽酶:A、B、C和Y。其中A和B分別來自牛胰和豬胰;C得自柑橘葉;Y取自面包酵母。研究多、使用廣泛的是羧肽酶A和B。羧肽酶A能釋放除脯氨酸﹑精氨酸和賴氨酸之外的所有C–末端殘基,而羧肽酶B只水解以堿性氨基酸精氨酸和賴氨酸為C-末端殘基的肽鍵。羧肽酶A和B的混合物能釋故除脯氨酸之外的任一C-末端殘基。羧肽酶￥可以作用于任何一個C–末端殘基。

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