MACS磁珠分選基本原理

用MACS磁珠標記細胞；

其次，將樣品加入到安置在分離器上的MACS分選柱，已標記的細胞留在柱內，未標記的細胞先行流出；

較后，從分選器中移出分選柱，洗脫已標記的細胞。

2. MACS磁珠技術包含的三大獨特組成

① MACS MicroBeads (磁珠)

② MACS Columns (分選柱)

③ MACS Separators (分選器)

其中，**的MACS磁珠位于絕對領先地位。磁珠是與高度特異性單克隆抗體相偶聯的超順磁化微粒。

小磁珠（50 nm）：交聯程度低——不會引起細胞活化、無需去除磁珠即可繼續下游實驗、無毒性、可以生物降解、不會沉降、臨床細胞**中**可以使用的磁珠。

另外，就是MACS分選柱，可將磁場擴大10,000倍，從而實現分選細胞的高純度以及高回收率。MACS分選柱填充有不同規格的鐵珠，鐵珠表面有親水包被，不損傷細胞。可用于分選多種細胞及亞細胞物質、細菌、病毒、mRNA和蛋白質。不同規格的分選柱如下圖所示：

較后，就是MACS分選器：選擇合適的分選器也是實現細胞分選重要的一步。不同型號的分選柱有適配的分選器。

MACS微珠的分類

MACS磁珠分選策略

1. 陽性分選策略

優點：① 高純度，尤其是富集稀有的細胞

      ② 高回收率

      ③ 操作簡便、迅速

2. 去除分選策略

去除分選策略適用范圍：

去除不需要的細胞。

缺乏針對目的細胞的特異性抗體（如**細胞）。

需進一步通過陽性選擇分選細胞亞群。

3. 多重分選策略

（a）先去除分選后再陽性分選：

即先去除非目的細胞，再進行陽性分選。

適用范圍：

非目的細胞也表達用來陽性選擇目的細胞的抗原。

要分選非常稀有細胞，先去除非目的細胞再行陽性分選，可獲得高純度的目的細胞。

（b）多選微珠再陽選：

MACS多重分選是一種根據多種表面標志磁性分選細胞的技術。

    分選流程：先用MACS多選微珠標記目的細胞，進行一次參數陽性分選。然后細胞與多選解離試劑共同孵育，后者可以將微珠從抗體上酶性解離下來。接著使用針對另一細胞表面標志的抗體-微珠復合物磁性標記陽性分選細胞。二次標記的細胞可以再次進行陽性分選或者去除分選。

較后，通過簡潔的MACS磁珠分選即獲得高純度、高回收率的目的細胞。