細(xì)胞膜包覆、靶向小膠質(zhì)細(xì)胞、具有多種類酶活性的超小納米探針，通過清除腦部活性氧調(diào)控小膠質(zhì)細(xì)胞表型，緩解腦部氧化應(yīng)激及改善炎癥環(huán)境。

實(shí)驗(yàn)方法概要：

**通過超小Cu2?xSe納米顆粒表面的Cu2+離子絡(luò)合槲皮素（簡寫為CSPQ納米顆粒），賦予納米顆粒類過氧化氫酶（CAT）、類過氧化物酶（POD）和類超氧化物歧化酶（SOD）的性質(zhì)，實(shí)現(xiàn)優(yōu)于單一槲皮素和單一Cu2?xSe納米顆粒的ROS清除能力。更優(yōu)的多種類酶活性使CSPQ納米顆粒具有**的抗炎作用，可以將小膠質(zhì)細(xì)胞極化為具有神經(jīng)保護(hù)作用的M2表型。

其次，我們采用神經(jīng)元細(xì)胞（MES23.5細(xì)胞）的細(xì)胞膜包覆CSPQ，賦予其**的靶向小膠質(zhì)細(xì)胞的性能，并揭示**靶向性能是由于神經(jīng)元細(xì)胞膜表面的血管內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子VCAM-1和小膠質(zhì)細(xì)胞表面的整合素α4β1之間的特異性相互作用。最后，我們利用聚焦超聲打開血腦屏障將超小納米顆粒**遞送至腦部、改善氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)，**提高帕金森模型小鼠的學(xué)習(xí)和認(rèn)知功能。

圖文解析

如圖一所示，我們利用超小Cu2-xSe納米顆粒表面的Cu2+離子絡(luò)合槲皮素，制備了具有**清除ROS能力的CSPQ納米顆粒，其清除能力優(yōu)于單純的槲皮素（QP）和Cu2-xSe納米顆粒（CSP）。酶活性檢測試劑盒證明所得CSPQ納米顆粒通過多種類酶活性（CAT、SOD、 POD酶）清除ROS。

如圖二所示，我們檢測了CSPQ納米顆粒對細(xì)胞微環(huán)境的調(diào)控作用，以及對細(xì)胞的保護(hù)作用機(jī)制。CSPQ納米顆粒被吞入細(xì)胞后，對BV2和3T3、以及SH-SY5Y細(xì)胞均表現(xiàn)出較低的毒性，并且可以**清除小膠質(zhì)細(xì)胞BV2中的ROS，明顯改善SH-SY5Y細(xì)胞的膜電位和形態(tài)。利用流式分析和免疫熒光方法，我們發(fā)現(xiàn)CSPQ納米顆粒可以將小膠質(zhì)細(xì)胞BV2極化為對神經(jīng)具有保護(hù)作用的M2表型，**促炎因子IL-6的釋放，同時(shí)促進(jìn)抗炎因子IL-10的釋放。納米顆粒還使SH-SY5Y細(xì)胞的抗凋亡因子Bcl-2表達(dá)上調(diào)，促凋亡因子caspase-3表達(dá)下調(diào)。

如圖三所示，為了提高CSPQ納米顆粒的遞送效率和效果，我們提取神經(jīng)元細(xì)胞MES23.5的細(xì)胞膜，包覆CSPQ納米顆粒。發(fā)現(xiàn)細(xì)胞膜包裹明顯增加了小膠質(zhì)細(xì)胞對CSPQ納米顆粒的吞噬，具有**的靶向性，其靶向作用是由于小膠質(zhì)細(xì)胞表面高表達(dá)的整合素α4β1與神經(jīng)元細(xì)胞MES23.5表面的血管細(xì)胞黏附分子VCAM-1之間的特異性相互作用。

由于Cu2-xSe納米顆粒在近紅外區(qū)具有很強(qiáng)的表面等離子體共振吸收，可以**地將近紅外光轉(zhuǎn)化為熱實(shí)現(xiàn)光聲成像，因此，我們利用光聲成像監(jiān)測CSPQ@CM納米顆粒在腦部的富集效果，發(fā)現(xiàn)與沒有聚焦超聲相比，采用聚焦超聲打開血腦屏障可以**提高納米顆粒在腦部的富集量（如圖四所示）。

我們通過兩次尾靜脈注射CSPQ@CM納米顆粒**帕金森小鼠（如圖五所示）。**之后的小鼠在轉(zhuǎn)棒實(shí)驗(yàn)中，停留在轉(zhuǎn)棒上的時(shí)間明顯增加。在水迷宮實(shí)驗(yàn)中，游泳速度得到提升，能夠快速找到逃生平臺(tái)。在空間探索實(shí)驗(yàn)中，**組小鼠的記憶認(rèn)知也得到明顯改善，穿過逃生平臺(tái)的次數(shù)明顯增多。此外，我們利用Elisa檢測不同組小鼠的腦脊液中多巴胺含量，發(fā)現(xiàn)經(jīng)過**的小鼠腦脊液中多巴胺含量增加。腦部組織的尼氏染色、TH、IBA-1免疫熒光顯示，CSPQ@CM納米顆粒可以**改善帕金森小鼠腦部微環(huán)境，提高帕金森病的**效果。

溫馨提示：西安齊岳生物供應(yīng)細(xì)胞膜包裹各種有機(jī)無機(jī)納米顆粒材料，被包裹的有機(jī)無機(jī)納米顆粒材料有：四氧化三鐵磁性納米顆粒、介孔二氧化硅納米顆粒、PLGA聚合物納米顆粒、共聚物二親納米膠束、溫敏水凝膠、納米金顆粒和納米金棒、介孔硅包磁性納米顆粒上轉(zhuǎn)換納米顆粒、四氧化三鐵磁性納米顆粒、各種納米囊泡、各種多糖的白蛋白納米粒子、二氧化硅納米顆粒、熒光量子點(diǎn)、上轉(zhuǎn)換納米發(fā)光顆粒、白蛋白納米粒子、 碳納米管等等各種的材料。西安齊岳生物提供的所有產(chǎn)品僅用于科研，不能用于人體。