西安齊岳生物科技有公司自己的實驗室**合成熒光標記的蛋白,糖,氨基酸,高分子等產品,我們可以提供的熒光染料包括有以下不同波段的熒光染料產品,熒光染料包括以下熒光染料FITC/Rhodamine/TRITC/Comarin/Bodipy/ICG/CY3/CY3.5/CY5/CY5.5/CY7/CY7.5等等。
融合蛋白含義之一即是通過DNA重組技術得到的兩個基因重組后的表達產物。 構建融合蛋白的原則是將**個蛋白基因的終止密碼子刪除,再接上帶有終止密碼子的**個蛋白基因,即可實現2個基因的融合表達。
提供一種 FITC標記蛋白的使用方法
1.制備溶于0.1M碳酸鈉緩沖液( pH 9.0 )的待標記蛋白溶液,濃度≥2mg/ml.
2 )溶解FITC于無水DMSO配制成1mg/ml的溶液。
3 )對于1ml蛋白溶液加入50μFITC溶液,可按照每次5μ的量邊加邊輕輕攪拌蛋白溶液;
4 )待所需FITC加入完畢,將反應液于4°C避光孵育8h ;
5 )加入NH4CI使其終濃度至50mM , 4°C終止反應2h ;
6)加入二甲苯青至濃度0.1% ,甘油至濃度5% ;
7 )通過大小孔徑合適的凝膠過濾層析分離排除未被結合的FITC ,分離范圍在20,000至50,000 (球蛋白例如抗體)。待凝膠柱平衡后,將以上反應混合波從柱頂注入,
打開凝膠柱,待其全部流入柱床后,加入PBS緩沖液。
此時,可以形成兩條帶: a,快速移動帶,也就是FITC-蛋白標記物,先被洗脫,通常于室內光下可看到; b,慢速移動帶,也就是未結合蛋白的FITC和二=甲苯青。僅僅在PBS緩沖液清洗后被洗脫出來。
8 )于4°C避光儲存上述偶聯物,加入0.1% ( w/v )疊氮化鈉作為-種防腐劑。若蛋白濃度較低( < 1mg/ml) , 可加入1%BSA作為-種蛋白穩定劑。
9)標記物中熒光素和蛋白的比值( F/P )可通過測定495nm和280nm處的吸光值來鑒定, F/P應位于0.3-1.0。小于該比例則信號太低,高于該比例則背景太高。
我們會列出一些產品供大家參考:
FITC熒光標記乳蛋白
FITC熒光標記黏液蛋白
FITC熒光標記仿生鐵蛋白
FITC熒光標記融合蛋白tTF-EG3287
FITC熒光標記重組蝎氯毒素gCTX融合蛋白
FITC熒光標記融合蛋白
FITC熒光標記NGR-VEGI
FITC熒光標記血小板糖蛋白
CY3熒光素標記甘露糖 6-磷酸-人血清白蛋白(M6P-HSA)
FITC熒光標記熱休克蛋白HSP27
FITC熒光標記硒結合蛋白 FITC熒光標記 SBPFITC熒光標記
FITC熒光標記鋅指蛋白FITC熒光標記60
FITC熒光標記微管蛋白α6 α-tubulin
用途:科研
狀態:固體/粉末/溶液
產地:西安
儲存時間:1年
保存:冷藏
廠家:西安齊岳生物科技有限公司