鏈霉親和素 - 生物素結合探針Biotin-Avidin用于熒光檢測

生物素與鏈霉親和素的結合是目前自然界中已知的比較強的非共價相互作用,正因為如此,該體系引起了各個領域研究人員的廣泛關注.生物素-親和素系統（Biotin-Avidin—System，BAS）是70年代末發展起來的一種新型生物反應放大系統。隨著各種生物素衍生物的問世，BAS很快被廣泛應用于醫學各領域。近年大量研究證實，生物素—親和素系統幾乎可與目前研究成功的各種標記物結合。生物素與親和素之間高親合力的牢固結合以及多級放大效應，使BAS免疫標記和有關示蹤分析更加靈敏。它已成為目前廣泛用于微量抗原、抗體定性、定量檢測及定位觀察研究的新技術。

靶標激活的化學探針（target-activated chemical probes）是基礎生物學研究和醫學診斷中監測酶活性和反應性小分子的重要工具。其中基于熒光開啟機制（turn-on）的探針可以分為兩類：基于染料的熒光探針（通過FRET, PET, AIE等方式開啟熒光）和caged-luciferin。

而在這篇文章中，作者發展了一種新型的turn-on化學探針，其中熒光開啟是基于鏈霉親和素-生物素結合（簡稱CBP）。CBP的原理是基于生物素與鏈霉親和素具有高的親和力（Kd = 10-14M），而在生物素的N-1氮上進行化學修飾形成caged-biotin能**降低親和力（Kd=10-5 M），因此在沒有待測物的情況下，細胞上的CBP表面將不能與熒光團修飾的鏈霉抗生物素結合。 而待測物的存在會觸發生物素decage，熒光團修飾的鏈霉抗生物素將結合到生物素探針上。 因為在一個鏈霉親和素分子上有多個熒光團，因此可以**地放大輸出信號。 同時，也可以根據實際情況在鏈霉親和素上結合不同的熒光團，如Cy5，Cy3或Alexa488。與常規探針相比，CBP具有幾個優點，如背景低，信號可以數倍擴增，染料的選擇范圍寬。在這篇文章中，作者將該方法成功應用于巨噬細胞表面分泌過氧亞硝酸鹽（ONOO）的成像。這種CBP探針的設計理念不僅可以用于熒光檢測，而且還可以應用在各種其他檢測模式下，如電化學和酶放大發光檢測。

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