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雙孢蘑菇凝集素(ABL);ABL,Unconjugated Agaricus bisporus lectin (ABL)
發(fā)布時間:2022-04-26     作者:ysl   分享到:

西安齊岳生物**供應(yīng)一系列的凝集素;同時提供各種熒光標(biāo)記修飾偶聯(lián)的凝集素。提供羅丹明、CY3、CY5、FITC、生物素Biotin、瓊脂糖Agarose、DyLight 488、DyLight 594、DyLight 649、Texas Red標(biāo)記各種凝集素。

雙孢蘑菇凝集素(ABL)是由兩個至四個非常相似的分離蛋白組成,每個四聚體約17 kD亞基。這種凝集素結(jié)合Thomsen-Friedenreich抗原,也稱為T-二糖,半乳糖基(β-1,3)N-乙酰半乳糖胺。不同于花生凝集素,它不結(jié)合唾液酸化的T抗原,ABL結(jié)合唾液酸化或無唾液酸化的形式。ABL結(jié)合所有血型和IgA亞類的O-連接聚糖。簡單的一糖和二糖只具有輕微的。

FITC標(biāo)記凝集素的組織化學(xué)染色程序

1.組織切片經(jīng)脫蠟處理,若是Bouin液固定的組織,用70%乙醇洗3次除去組織切片內(nèi)的黃色后,再用蒸餾水漂洗;

2.PBS漂洗(含1%牛血清白蛋白)2次,每次5分鐘;

3.加入FITC-凝集素(PBS適當(dāng)*釋),置濕盒內(nèi)孵育,室溫1小時;

4.PBS漂洗3次,每次5分鐘;

5.水溶性封片劑封片,熒光顯微鏡觀察。

6.結(jié)果 FITC標(biāo)記的凝集素能直接與組織細胞內(nèi)的糖基結(jié)合,從而顯示糖基的位置,可用于檢測組織細胞中的糖成分,陽性部位呈黃綠色熒光。

7.注意事項

(1)固定液:以Bouin固定液為佳,也可用70%乙醇固定;

(2)與其他組織化學(xué)方法一樣,染色過程中,應(yīng)始終保持一定濕度,使切片保持濕潤狀態(tài);

(3)需經(jīng)預(yù)實驗確定FITC-凝集素的*佳工作濃度;

(4)凝集素的活性部位需重金屬離子維持,故可用TBS作為緩沖液,加微量的金屬(CaCl2、MgCl2、MnCl2各1.0mmol/L),可增強凝集素的結(jié)合能力。

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