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鏈霉親和素(SA)的介紹及各熒光染料的激發(fā)波長
發(fā)布時(shí)間:2022-04-02     作者:lh   分享到:

  鏈霉親和素(SA)簡述:

  鏈霉親和素(SA)是Streptomycesavidinii菌的分泌物,其分子量和結(jié)合生物素的能力與蛋清中的親和素相似,等電點(diǎn)6.0,非特異性結(jié)合遠(yuǎn)低于親和素。

  鏈霉親和素(SA)來源:

  SA是Streptomycesaviclrdi菌培養(yǎng)過程中的分泌物,主要通過21亞氨基生物索親和層析法進(jìn)行凈化。1L培養(yǎng)液含有10~60mg的蛋白質(zhì)。鏈霉親和素是一種大小為66kda的四聚體蛋白質(zhì)。一分子鏈霉親和素可以與四分子生物素高度特異化,兩者之間的親和力**。

  應(yīng)用鏈霉親和素(SA):

  酶免疫測定enzymeimunoassays。

  免疫組織化學(xué),imunohistochemistry。

  流式細(xì)胞儀,flowcytometry。

  westernblot,原位雜交。

  imunoblotingprocedures免疫印刷程序。

  westernblot免疫痕跡。

熒光標(biāo)記物激發(fā)波長

  介紹熒光標(biāo)記鏈霉親和素(SA):

  FITC-Streptavidin:

  FITC是一種廣泛使用的熒光基團(tuán),但其**的缺點(diǎn)是淬滅速度快,使用抗淬滅劑可以減少。

  花青染料:

  Cy3比FITC更穩(wěn)定,在表面熒光顯微鏡下,Cy3的熒光FITC更強(qiáng)。Cy3和Cy5比大多數(shù)熒光基團(tuán)更亮、更穩(wěn)定、背景更弱。兩者經(jīng)常在共聚焦顯微實(shí)驗(yàn)中標(biāo)記更多。但Cy5的缺點(diǎn)是不能用表面熒光顯微鏡觀察,所以通常用遠(yuǎn)紅外檢測器的共聚焦顯微鏡觀察。

  TRITC-Streptavidin:

  TRITC、RRX、TR:TRITC經(jīng)常與FITC一起用于雙標(biāo)記實(shí)驗(yàn)或TR,但TR會(huì)產(chǎn)生更高的背景。RRX在使用含氪氫燈的激光聚焦掃描顯微鏡作為三標(biāo)記實(shí)驗(yàn)時(shí)特別有用,可以和Cy3(或FITC)和Cy5一起使用,因?yàn)镽RX的發(fā)射波長在Cy3和Cy5之間,很少與之重疊。

        西安齊岳生物提供酶HRP,熒光FITC,Biotin、Cy3、Cy5、Cy7、羅丹明等熒光物質(zhì)標(biāo)記蛋白,標(biāo)記位置是氨基,標(biāo)記的蛋白有:牛血紅蛋白、膠原蛋白、鏈霉親和素、大鼠免疫球蛋白、牛胎球蛋白、人轉(zhuǎn)鐵蛋白、胰島素、重組蛋白G等幾十種蛋白,提供檢測圖譜。

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