綠色熒光蛋白標(biāo)記試劑盒

一. 綠色熒光蛋白標(biāo)記試劑盒說明

綠色熒光蛋白1962年在一種學(xué)名Aequoreavictoria的水母中發(fā)現(xiàn)。其基因所產(chǎn)生的蛋白質(zhì)，在藍(lán)色波長范圍的光線激發(fā)下，會(huì)發(fā)出綠色螢光。

這個(gè)發(fā)光的過程中還需要冷光蛋白質(zhì)Aequorin的幫助，且這個(gè)冷光蛋白質(zhì)與Ca離子(Ca2+)可產(chǎn)生交互作用。

本產(chǎn)品將綠色熒光蛋白的基因插入慢病毒介導(dǎo)的載體中，通過flap-Ub啟動(dòng)子過表達(dá)從而作為報(bào)告基因，在細(xì)胞中表達(dá)。

常用于細(xì)胞標(biāo)記后移植追蹤，從而評(píng)估移植后細(xì)胞的歸巢以及**效果等。

二.綠色熒光蛋白標(biāo)記試劑盒組份

 三. 綠色熒光蛋白標(biāo)記試劑盒的注意事項(xiàng)

綠色熒光標(biāo)記液避免反復(fù)凍融，操作時(shí)要戴手套和口罩。該產(chǎn)品僅限于非臨床性科研使用。

四. 操作步驟

細(xì)胞傳代培養(yǎng)到6孔板或者6cm盤中12-16小時(shí)后，將綠色熒光蛋白標(biāo)記液0.3ml（6孔板一個(gè)孔中）或者0.5ml（6cm盤）分別與新鮮細(xì)胞培養(yǎng)液混勻，

比例為0.3ml綠色熒光蛋白標(biāo)記液中加入0.7ml新鮮培養(yǎng)液和1.0μl polybrene（終濃度8ng/ml），0.5ml綠色熒光蛋白標(biāo)記液中加入1.5ml新鮮培養(yǎng)液和2μl polybrean（終濃度8ng/ml）。

預(yù)混好的綠色熒光蛋白標(biāo)記液加入到目的細(xì)胞培養(yǎng)皿中，此時(shí)細(xì)胞密度不宜超過60%。

2個(gè)小時(shí)之內(nèi)每間隔15-30min輕輕晃動(dòng)被標(biāo)記的細(xì)胞培養(yǎng)皿，可以達(dá)到更好的標(biāo)記效果，

2小時(shí)之后培養(yǎng)皿中補(bǔ)充等體積的新鮮培養(yǎng)液，過夜培養(yǎng)后更換成新鮮培養(yǎng)液。48小時(shí)之后，在熒光顯微鏡下觀察標(biāo)記綠色熒光效率。

西安齊岳生物提供酶HRP，熒光FITC，Biotin、Cy3、Cy5、Cy7、羅丹明等熒光物質(zhì)標(biāo)記蛋白，標(biāo)記位置是氨基，標(biāo)記的蛋白有：牛血紅蛋白、膠原蛋白、鏈霉親和素、大鼠免疫球蛋白、牛胎球蛋白、人轉(zhuǎn)鐵蛋白、胰島素、重組蛋白G等幾十種蛋白，提供檢測圖譜。

5(6)-羧基-X-羅丹明（混合物）;5(6)-ROX

5-羧基-X-羅丹明（單一化合物）;cas216699-35-3;5-ROX

6-羧基-X-羅丹明（單一化合物）;cas194785-18-7;6-ROX

5(6)-羧基-X-羅丹明琥珀酰亞胺酯（混合物）;5(6)-ROX, SE

5-羧基-X-羅丹明琥珀酰亞胺酯（單一化合物）;cas209734-74-7;5-ROX, SE

6-羧基-X-羅丹明琥珀酰亞胺酯（單一化合物）;cas216699-36-4;6-ROX, SE

5-(4,6-二氯三嗪基)氨基熒光素;cas102417-95-8;5-DTAF

6-(4,6-二氯三嗪基)-氨基熒光素(鹽酸鹽);cas118357-32-7;6-DTAF

AMCA酸;cas106562-32-7;AMCA acid

AMCA-X 琥珀酰亞胺酯;cas216309-02-3;AMCA-X, SE

7-羥基-3-羧基香豆素;cas779-27-1

7-羥基-3-羧基香豆素琥珀酰亞胺酯;cas134471-24-2

7-羥基-4-甲基香豆素-3-乙酸;cas5852-10-8

7-羥基-4-甲基香豆素-3-乙酸琥珀酰亞胺酯;cas113721-87-2

7-甲氧基-3-羧基香豆素;cas20300-59-8

7-甲氧基-3-羧基香豆素琥珀酰亞胺酯 ;cas150321-92-9

Super Texas Red琥珀酰亞胺酯;Super Texas Red,SE

熒光胺;cas38183-12-9;Fluorescamine

熒光素-5-馬來酰亞胺;cas75350-46-8;Fluorescein-5-maleimide

mBBr ;cas74235-78-2;mBBr [Monobromobimane]

bBBr;cas68654-25-1;bBBr [Dibromobimane]

磺基羅丹明101磺酰肼;TR hydrazide

磺基羅丹明101尸磺胺;TR cadaverine

EDANS酸;cs50402-56-7;EDANS acid

EDANS鈉鹽;cas100900-07-0;EDANS  sodium salt

8-氨基芘-1,3,6-三磺酸三鈉鹽;cas196504-57-1;APTS

Dansyl 尸胺;cas10121-91-2;Dansyl cadaverine

N-BOC-尸胺;ca51644-96-3;N-BOC-cadaverine

N-BOC-乙二胺;cas57260-73-8;N-BOC-ethylenediamine

N-FMOC-乙二胺;N-FMOC-ethylenediamine

N-FMOC-尸胺;N-FMOC-cadaverine

以上資料來自小編zhn2022.03.11

溫馨提示：僅用于科研