糖體是錐蟲體內(nèi)與過氧化物酶體相關(guān)的細(xì)胞器,含有代謝途徑,如糖酵解和糖核苷酸的生物合成,通常存在于其他真核生物的胞質(zhì)中。盡管沒有已知的過氧化物酶的靶向信號(hào)(PTS1和PTS2),但udp -葡萄糖焦磷酸化酶(UGP)是一種負(fù)責(zé)糖核苷酸udp -葡萄糖合成的酶,定位于血液中的胞漿、糖體和前環(huán)錐蟲體內(nèi)。
我們?cè)谶@里要解決的問題是(i)糖核苷酸的不尋常的糖體生物合成途徑是功能性的(ii)不含pts的UGP是如何導(dǎo)入糖體的?他們發(fā)現(xiàn)UGP是通過攜帶在含有磷酸烯醇丙酮酸羧激酶(PEPCK)的糖體pts1上而進(jìn)入糖體的,并確定了參與UGP/PEPCK相互作用的結(jié)構(gòu)域。近距離連接試驗(yàn)表明,這種相互作用發(fā)生在3 - 10%的糖體中,這表明它們對(duì)應(yīng)于能夠輸入蛋白質(zhì)的細(xì)胞器。
我們還表明,UGP對(duì)錐蟲的生長(zhǎng)至關(guān)重要,涉及UGP的糖體和細(xì)胞質(zhì)代謝途徑都是功能性的,因?yàn)榍玫蚒GP突變細(xì)胞株(RNAiUGP,RNAi表明RNA干擾)通過在細(xì)胞器中表達(dá)編碼的UGP (rUGP) (RNAiUGP/EXPrUGP-GPDH,其中GPDH是甘油-3-磷酸脫氫酶)而獲救。我們的結(jié)論得到了靶向代謝組學(xué)分析(離子色譜-高分辨率質(zhì)譜[IC-HRMS])的支持,表明在RNAiUGP突變體中不再檢測(cè)到udp -葡萄糖,而它仍然在胞漿(PEPCK空突變體)或糖體(RNAiUGP/EXPrUGP-GPDH)中表達(dá)UGP的細(xì)胞中產(chǎn)生。錐蟲是已知的**選擇過氧化物酶體(糖體)糖核苷酸生物合成途徑的生物,除了**的胞質(zhì)途徑。
細(xì)胞器內(nèi)不同尋常的代謝途徑分區(qū)化是錐蟲最神秘的特征之一。這些單細(xì)胞真核生物是**將糖酵解隔離在過氧化物酶體(糖體)內(nèi)的生物,盡管這種分隔的選擇性優(yōu)勢(shì)仍不清楚。錐蟲在糖核苷酸生物合成途徑的酶的糖體定位上也是獨(dú)一無二的,這些酶也存在于細(xì)胞質(zhì)中。在這里,我們顯示細(xì)胞質(zhì)和糖體途徑是功能性的。在所有其他真核生物中,細(xì)胞質(zhì)途徑為糖基化反應(yīng)提供了營(yíng)養(yǎng);然而,重復(fù)的糖體途徑的作用目前尚不清楚。
我們還發(fā)現(xiàn),其中一種酶(UGP)通過攜帶另一種糖體酶(PEPCK)導(dǎo)入糖體;它們?cè)诠δ苌蠜]有關(guān)聯(lián)。UGP/PEPCK的關(guān)聯(lián)是獨(dú)特的,因?yàn)?*報(bào)道的所有搭載例子都涉及功能相關(guān)的相互作用伙伴,這擴(kuò)大了作為異質(zhì)寡聚體進(jìn)口的載體蛋白的可能組合。
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