UDP糖|溶組織內阿米巴和入侵內阿米巴的核苷酸糖轉運體參與幾丁質合成
幾丁質是β-(1,4)連接的n -乙酰氨基葡萄糖(GlcNAc)的均聚物,是原生動物寄生蟲溶組織內阿米巴(Eh)和入侵內阿米巴(Ei)囊壁的主要成分。
內阿米巴幾丁質合成酶在真菌的囊泡膜而不是質膜上制造幾丁質,盡管幾丁質合成的化學過程很可能是相同的。然而,核苷酸糖轉運體(NSTs)在內阿米巴幾丁質合成中的作用尚未確定。
利用Eh的UDP-GlcNAc轉運體EhNst3的氨基酸序列,通過BLASTP分析確定了Ei的UDP-GlcNAc轉運體(EiNst5)。結果表明,EhNst3和EiNst5的異體表達可以補充YEA4突變體中Yea4p(釀酒酵母的UDP-GlcNAc轉運體)的功能,增加細胞壁幾丁質含量。與釀酒酵母中的Yea4p相似,Δyea4細胞中myc表位標記的EhNst3和EiNst5定位于內質網。
EiNST5轉錄本在大腸桿菌體外成囊和氧化應激過程中表達上調。在氧化應激下,EhNST3也出現了類似的上調。
使用基因特異性dsRNA下調EiNst5的表達,可以**減少大腸桿菌體外囊化過程中的囊腫形成。我們的觀察首次表明EhNst3和EiNst5參與了幾丁質的合成,也參與了內阿米巴的成囊過程。
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