枯草芽孢桿菌168 EpsC在SwissProt數(shù)據(jù)庫(kù)中被標(biāo)注為“Probable多糖生物合成蛋白”。
epsC是eps操縱子的一部分,被認(rèn)為參與了胞外聚合物物質(zhì)(eps)的生物合成。本研究旨在確定EpsC的分子功能。
序列分析EpsC建議一個(gè)跨膜域的存在。克隆并過(guò)表達(dá)2個(gè)n端缺失突變體,其中缺失1-89 (EpsC89)和1-115 (EpsC115)殘基。
采用反相**液相色譜、表面等離子體共振(SPR)和吸收光譜研究酶活性和底物偏好。
這些數(shù)據(jù)表明,EpsC在體外具有UDP-GlcNAc 4,6-脫水酶活性。
純化的重組蛋白利用UDP-Glc和TDP-Glc也作為底物。
此外,EpsC115可以利用UDP-Gal和UDP-GalNAc作為底物,而EpsC89只能結(jié)合這兩個(gè)糖核苷酸。
這些結(jié)果表明,刪除一個(gè)更長(zhǎng)的n端地區(qū)擴(kuò)大底物特異性。
這些拓寬的特異性可能是假定的跨膜結(jié)構(gòu)域缺失的結(jié)果,可能在體內(nèi)不存在。
EpsC和氨基轉(zhuǎn)移酶EpsN (Kaundinya CR et al.,糖生物學(xué),2018)和乙酰轉(zhuǎn)移酶EpsM(未發(fā)表的數(shù)據(jù))似乎參與了N,N ' -二乙酰桿菌胺的生物合成。
UDP-L-RhaNAc | UDP-4n-D-FucNAc |
UDP-D-XylNAc | UDP-VioNAc |
UDP-2-Biotinyl-GalNAc | UDP-6-Biotinyl-GalNAc |
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