綠色熒光標記海藻糖FITC-Trehalose的合成路線和方法
綠色熒光標記海藻糖FITC-Trehalose的合成路線和方法
DMF,N,N-二甲基甲酰胺
1、稱取海藻糖50 mg溶于3 ml DMF中,加入丁二酸酐(1.0 eq.)、DMAP(0.1 eq.)和三乙胺(TEA,1.0 eq.)溶解完全,60 °C下反應2 h,倒入大量冰乙醚中沉淀,離心收集產物,將產物重復溶解沉淀2次,得到羧基化的海藻糖。
2、稱取羧基化的海藻糖10 mg溶于2 ml DMF,加入5-氨基熒光素(1.2 eq.),DIC(1.2 eq.)和DMAP(0.1 eq.)溶解完全,40 °C下反應6 h,倒入大量冰乙醚中沉淀,離心收集產物,將產物重復溶解沉淀2次,得到FITC-海藻糖粗品。將粗品采用無水乙醇和乙醚的混合溶劑重結晶3次,得到FITC-海藻糖純品。