高密度環(huán)氧基磁珠|環(huán)氧基磁性微球（1微米）

一、概述

環(huán)氧基磁性微球提供永久結(jié)合和固定各種含胺基、巰基配體。 珠子表面上的高密度環(huán)氧酸基團(tuán)（Epoxy）可用于配體如蛋白質(zhì)、肽和核酸的共價(jià)偶聯(lián)。 環(huán)氧基磁珠可用于共價(jià)偶聯(lián)胺、巰基或含羥基的配體。含羥基、胺和巰基的配體的偶聯(lián)分別在pH 11-13、pH> 9和pH 7.5~8.5下反應(yīng)。不溶于水的配體可在50％有機(jī)溶劑（二甲基甲酰胺）中偶聯(lián)。PuriMag Homo-Epoxy包含短臂和長(zhǎng)臂磁珠，都適用于蛋白質(zhì)和多肽的偶聯(lián)。。

二、產(chǎn)品特性

1.       PuriMag HomoS-Epxoy短鏈羧基磁珠

基團(tuán)密度> 400 umoles Epoxy/g beads

2.       PuriMag HomoL-Epoxy長(zhǎng)鏈羧基磁珠

基團(tuán)密度> 200 μmoles Epoxy/g beads

形態(tài)：超順磁球形

直徑：1μm

儲(chǔ)存：10 mg/mL ，去離子水中 2~8 °C保存，勿凍結(jié)。

常溫運(yùn)輸，正確使用保存期一年。

三、偶聯(lián)方案

環(huán)氧基磁珠PuriMag Homo-Epoxy有利于小配體與磁珠的結(jié)合，包括但不限于單糖、肽和二糖。 它也可用于偶聯(lián)各種配體，如蛋白A、StrepTactin、枯草桿菌蛋白酶和免疫球蛋白。 如果配體負(fù)載量太低，可能會(huì)導(dǎo)致非特異性吸附過(guò)大；如果配體負(fù)載量過(guò)高，可能會(huì)造成空間位阻。因此，強(qiáng)烈建議優(yōu)化每個(gè)單獨(dú)應(yīng)用的磁珠用量。推薦用量一般為0.04~0.4 mg多肽/ mg磁珠。 以下實(shí)驗(yàn)方案可相應(yīng)放大和縮小。

A. 緩沖液

1) 偶聯(lián)緩沖液（Coupling Buffer）: 0.1 M sodium carbonate buffer or 0.1 M sodium phosphate, pH 8.5-10;

注意：緩沖液的離子強(qiáng)度對(duì)于獲得更高的偶聯(lián)效率至關(guān)重要。 偶聯(lián)緩沖液應(yīng)具有小的離子強(qiáng)度，并且不應(yīng)含有任何氨基（例如Tris）、硫醇、羥基和酚。但洗滌或儲(chǔ)存緩沖液可含有氨基、硫醇、羥基和酚基團(tuán)。

2) 封閉緩沖液（Blocking Buffer）: 1 M ethanolamine， pH 9.0;

3) 洗滌緩沖液（Wash buffer）: PBS, pH 7.4.;

B. 偶聯(lián)方法

注意：將環(huán)氧基磁珠按10mg/ml懸浮在50％丙酮中，劇烈渦旋分散磁珠并儲(chǔ)存在4 ℃。使用前混勻磁珠。

1. 將10mg磁珠轉(zhuǎn)移至EP管中。

2. 將EP管置于磁磁力架上1min，吸棄上清液，用1ml偶聯(lián)緩沖液重新懸浮磁珠。

3. 重復(fù)步驟2三次。

注意：一旦水化，應(yīng)盡快使用磁珠。

4. 將適量的蛋白質(zhì)或肽溶解在1ml偶聯(lián)緩沖液中。

注意：環(huán)氧基活化磁珠的偶聯(lián)效率因配體而異。用戶應(yīng)根據(jù)經(jīng)驗(yàn)優(yōu)化配體的濃度。推薦1-10 mg/ml用于蛋白質(zhì)結(jié)合；對(duì)于小肽，配體濃度應(yīng)超過(guò)200 umol/ml。

5. 將蛋白質(zhì)溶液加入洗過(guò)的磁珠中，重懸磁珠并孵育。

注意：胺類配體如蛋白質(zhì)在25 ℃下偶聯(lián)15~48 h。但是，如果配體對(duì)溫度非常敏感，可在4℃下偶聯(lián)至少48~72 h。肽、含羥基的配體例如碳水化合物或含巰基的配體在25~75 ℃下偶聯(lián)4~15 h。

6. 用1ml PBS緩沖液洗磁珠3次。

7. 將0.5~1ml封閉緩沖液添加至磁珠中，并在4℃下孵育至少4h或過(guò)夜。

8. 用1ml PBS緩沖液洗磁珠4-6次。

9. 用PBS緩沖液（0.1％疊氮化物）將磁珠重懸至所需濃度，儲(chǔ)存于2~8 ℃并避免凍結(jié)。

用途:科研

純度:≥95%

保存時(shí)間: 1年

產(chǎn)地:西安

供應(yīng)商：西安齊岳創(chuàng)科生物科技有限公司

注意事項(xiàng):僅用于科研不用于人體