環氧基修飾載玻片：

糖芯片技術是將糖鏈作為探針固定到載體上,用于檢測糖結合蛋白的一類生物芯片技術。

本實驗利用二硫蘇糖醇和碘乙酰胺依次處理原樣蛋白質后,用胰蛋白酶進行酶切.通過濾膜輔助法利用凝集素從上述酶切產物中提取含有特定糖鏈結構的糖肽.利用糖肽N-端的氨基與環氧基團的反應,將其共價固定到環氧化修飾的載玻片上,制備糖肽芯片.將Cy3標記的蛋白質樣本與糖肽芯片進行孵育,掃描孵育后芯片上的熒光信號值,分析比較糖結合蛋白的變化.本實驗確定了制備糖肽芯片的**點樣緩沖液是pH9.3的0.1M的Na2C03緩沖液。

來源：[1]張志偉. 糖肽芯片檢測糖結合蛋白方法的建立及應用[D]. 西北大學, 2017.

文章涉及材料：

玻璃片基(76mm X 25mmX 1mm)

牛血清白蛋白(BSA)

Cy3

Cy5

凝集素LCA和ConA

環氧基修飾玻片

Cy3標記的BSA

Cy3標記核糖核酸酶B（RNaseB）

甘氨酸

十二烷基磺酸鈉(SDS)

溴酚藍

三羥甲基氨基甲烷(Tris)

丙烯酸胺

N,N-甲叉丙烯酸酯

凝集素包括木菠蘿凝集素(Jacalin)

太陽麻凝集素(Crotalaria)

植物血球凝集素P；Phytohaemagglutinin,(PHA)

蝸牛凝集素Helix Pomatia Agglutinin,(HPA)

麥胚凝集素Wheat germ agglutinin,(WGA）

花生凝集素Peanut agglutinin,(PNA）

大豆凝集素Soybean agglutinin,(SBA)

雙花扁豆凝集素(DBA）

荊豆凝集素Ulex Europaeus Agglutinin, (UEA-I)

小扁豆凝集素(LCA)

馬鈴薯凝集素(STL) ）

毛苕子凝集素Vicia villosa lectin (VVL, VVA)

番茄凝集素Lycopersicon Esculentum Agglutinin，LEA

兵豆凝集素Lens Culinaris Agglutinin(LcH)

橙黃網胞盤菌凝集素(AAL)

尾穗莧凝集素(ACL)

伴刀豆凝集素(ConA)

桑橙凝集素

槲寄生凝集素

紅腰果E型凝集素(PHA-E)

紅腰果L型凝集素(PHA-L)

豌豆凝集素(PSA)

蓖麻凝集素(RCA-I)

西澤接骨木凝集素(SNA)

槲寄生凝集素(VAL)

歐蔓陀羅凝集素(DSA)

喇叭水仙凝集素(NPA/NPl)

尾穗莧凝集素(ACA)

雪花蓮凝集素Galanthus Nivalis agglutinin, (GNA)

小編zhn2021.11.24