DAF-FM DA 一氧化氮（NO）熒光探針

DAF-FM DA是低濃度NO檢測和定量試劑，DAF-FM的熒光信號能被熒光檢測儀器檢測到，包括流式細胞儀，熒光顯微鏡，熒光酶標儀等。

產(chǎn)品關鍵詞：

DAF-FM DA；DAF-FM Diacetate；DAF-2 DA；Carboxy-PTIO；NO Scavenger 一氧化氮清除劑；SNP  一氧化氮供體；CAS NO. 254109-22-3；

產(chǎn)品描述

DAF-FM DA是一種細胞膜滲透性的一氧化氮（NO）熒光探針，Ex/Em=495/515nm。DAF-FM DA主動擴散穿透細胞膜，一旦進入細胞，胞內酯酶使其去乙酰化生成DAF-FM。DAF-FM本身熒光很弱，其熒光量子產(chǎn)率~0.005，但與NO反應后熒光增強約160倍，光量子達到~0.81。與早的NO探針-DAF-2相比，DAF-FM具有以下幾個優(yōu)勢：1）DAF-FM與NO形成的加合物的光譜不依賴pH（＞5.5）；2）DAF-FM與NO形成的加合物的光穩(wěn)定性明顯強于DAF-2/NO加合物；3）DAF-FM的NO檢測下限~3nM，比DAF-2靈敏度高（~5nM）。

本品以凍干粉形式提供，可用DMSO配制成儲存液后，用適當?shù)纳砭彌_液或培養(yǎng)基稀釋到所需工作濃度后進行探針加載。建議起始工作濃度范圍是1-10μM。

對于用量比較少的用戶，也可直接選擇我司提供的DAF-FM DA（5mM in DMSO）。

產(chǎn)品特性

1）  CAS NO：254109-22-3

2）   化學名：3′,6′-bis(acetyloxy)-4-amino-2′,7′-difluoro-5-(methylamino)-spiro[isobenzofuran-1(3H),9′-[9H] xanthen]-3-one

3）   英文同義名：DAF-FM Diacetate; 4-Amino-5-Methylamino-2′,7′-Difluorofluorescein Diacetate; 3-Amino, 4- aminomethyl-2?,7?-difluorofluorescein Diacetate; Diaminofluorescein-FM diacetate;

4）   中文同義名：DAF-FM二乙酸鹽；二氨基熒光素-FM二乙酸鹽；4-氨基-5-甲氨基-2′,7′-二氟熒光素二乙酸鹽；3-氨基, 4-氨甲基-2?,7?-二氟熒光素二乙酸鹽；

5）   分子式：C25H18F2N2O7

6）   分子量：496.42

7）   純度：≥98%（HPLC）

8）   外觀：淺黃色粉末

9）   溶解性：溶于DMSO（5mM）

10）化學結構：

保存與運輸方法

保存：-20oC避光干燥保存，2年。

運輸：室溫運輸。

注意事項

1）   BSA和酚紅對DAF-FM的熒光檢測有干擾，請避免體系內含有這些組分。

2）   為了您的和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

使用方法

一、儲存液制備

2.1   儲存液制備

取低溫保存的凍干粉置于室溫回溫-少20min，低速離心后，加入適量體積的無水DMSO配制成一定濃度的儲存液。比如，往1mg DAF-FM DA（Mw：496.42）加入402.88μl DMSO，充分溶解后配制成5mM儲存液。

2.2   儲存液保存

為了延長儲存液的保存時間，需根據(jù)單次用量分裝避光凍存，以小化反復凍融次數(shù)。分裝凍存的溶液-少穩(wěn)定保存6個月。

2.3   工作液制備

于正式實驗前，用合適的生理緩沖液或新鮮培養(yǎng)基取適量儲存液稀釋到工作濃度。工作液需現(xiàn)配現(xiàn)用，多余的工作液需丟棄。建議起始工作濃度范圍是1-10μM。

二、操作步驟

【注意】：以下操作步驟僅做參考。佳的加載濃度、時間和溫度需根據(jù)經(jīng)驗來調整。總的來說，以能達到檢測需求的低濃度佳。通過降低加載溫度能減緩亞細胞區(qū)室化現(xiàn)象。

2.1 細胞懸液或玻片上準備活細胞；

2.2 用適當緩沖液或新鮮培養(yǎng)基（不含血清和酚紅）稀釋DMSO儲存液。建議起始工作濃度范圍是1-10μM。

2.3 用稀釋好的DAF-FM DA工作液孵育細胞20~60min，孵育溫度為4~37℃。貼壁細胞不需消化后再加載。

2.4 用PBS, pH 7.4充分清洗細胞直-去除多余探針。更換新鮮緩沖液或培養(yǎng)基再孵育15~30min，使得細胞內酯酶能將探針充分去酯化。

2.5 激發(fā)和發(fā)射波長分別是495和515nm。因這些波長與熒光素（fluorescein）非常相似，因此，適用于熒光素（fluorescein）或FITC的檢測系統(tǒng)都行。

cas254109-22-3，DAF-FM DA ，一種NO熒光探針

DAF-FM DA

DAF-FM 雙乙酸鹽

二氨基熒光素-FM 二乙酸酯

4-Amino-5-(N-methylamin)-3′,6′-bis(acetyloxy)

4-Amino-5-(N-methylamino)-3′,6′-bis(acetyloxy)-2′,7′-difluoro-spiro[isobenzofuran-1(3H),9′-[9H]xanthen]-3-one;DAF-FMDAsolution

DAF-FMDA(cellpermeable)

-[9H]xanthen]-3-one

4-Amino-5-(N-methylamino)-3′;7′;9′

DAF-FM DA

DAF-FM DA探針

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