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DAF-FM DA,一氧化氮(NO)熒光探針,cas254109-22-3的使用說(shuō)明書
發(fā)布時(shí)間:2021-11-19     作者:zhn   分享到:

DAF-FM DA 一氧化氮(NO)熒光探針

DAF-FM DA是低濃度NO檢測(cè)和定量試劑,DAF-FM的熒光信號(hào)能被熒光檢測(cè)儀器檢測(cè)到,包括流式細(xì)胞儀,熒光顯微鏡,熒光酶標(biāo)儀等。

產(chǎn)品關(guān)鍵詞:

DAF-FM DADAF-FM DiacetateDAF-2 DACarboxy-PTIONO Scavenger 一氧化氮清除劑;SNP  一氧化氮供體;CAS NO. 254109-22-3

產(chǎn)品描述

DAF-FM DA是一種細(xì)胞膜滲透性的一氧化氮(NO)熒光探針,Ex/Em=495/515nmDAF-FM DA主動(dòng)擴(kuò)散穿透細(xì)胞膜,一旦進(jìn)入細(xì)胞,胞內(nèi)酯酶使其去乙酰化生成DAF-FMDAF-FM本身熒光很弱,其熒光量子產(chǎn)率~0.005,但與NO反應(yīng)后熒光增強(qiáng)約160倍,光量子達(dá)到~0.81。與早的NO探針-DAF-2相比,DAF-FM具有以下幾個(gè)優(yōu)勢(shì):1DAF-FMNO形成的加合物的光譜不依賴pH(>5.5);2DAF-FMNO形成的加合物的光穩(wěn)定性明顯強(qiáng)于DAF-2/NO加合物;3DAF-FMNO檢測(cè)下限~3nM,比DAF-2靈敏度高(~5nM)。

本品以凍干粉形式提供,可用DMSO配制成儲(chǔ)存液后,用適當(dāng)?shù)纳砭彌_液或培養(yǎng)基稀釋到所需工作濃度后進(jìn)行探針加載。建議起始工作濃度范圍是1-10μM

對(duì)于用量比較少的用戶,也可直接選擇我司提供的DAF-FM DA5mM in DMSO)。

產(chǎn)品特性

1  CAS NO254109-22-3

2   化學(xué)名:3,6-bis(acetyloxy)-4-amino-2,7-difluoro-5-(methylamino)-spiro[isobenzofuran-1(3H),9-[9H] xanthen]-3-one

3   英文同義名:DAF-FM Diacetate; 4-Amino-5-Methylamino-2,7-Difluorofluorescein Diacetate; 3-Amino, 4- aminomethyl-2?,7?-difluorofluorescein Diacetate; Diaminofluorescein-FM diacetate;

4   中文同義名:DAF-FM二乙酸鹽;二氨基熒光素-FM二乙酸鹽;4-氨基-5-甲氨基-2,7-二氟熒光素二乙酸鹽;3-氨基, 4-氨甲基-2?,7?-二氟熒光素二乙酸鹽;

5   分子式:C25H18F2N2O7

6   分子量:496.42

7   純度:≥98%HPLC

8   外觀:淺黃色粉末

9   溶解性:溶于DMSO5mM

10)化學(xué)結(jié)構(gòu):

image.png

保存與運(yùn)輸方法

保存:-20oC避光干燥保存,2年。

運(yùn)輸:室溫運(yùn)輸。

注意事項(xiàng)

1   BSA和酚紅對(duì)DAF-FM的熒光檢測(cè)有干擾,請(qǐng)避免體系內(nèi)含有這些組分。

2   為了您的和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

使用方法

一、儲(chǔ)存液制備

2.1   儲(chǔ)存液制備

取低溫保存的凍干粉置于室溫回溫-少20min,低速離心后,加入適量體積的無(wú)水DMSO配制成一定濃度的儲(chǔ)存液。比如,往1mg DAF-FM DAMw496.42)加入402.88μl DMSO,充分溶解后配制成5mM儲(chǔ)存液。

2.2   儲(chǔ)存液保存

為了延長(zhǎng)儲(chǔ)存液的保存時(shí)間,需根據(jù)單次用量分裝避光凍存,以小化反復(fù)凍融次數(shù)。分裝凍存的溶液-少穩(wěn)定保存6個(gè)月。

2.3   工作液制備

于正式實(shí)驗(yàn)前,用合適的生理緩沖液或新鮮培養(yǎng)基取適量?jī)?chǔ)存液稀釋到工作濃度。工作液需現(xiàn)配現(xiàn)用,多余的工作液需丟棄。建議起始工作濃度范圍是1-10μM

二、操作步驟

【注意】:以下操作步驟僅做參考。佳的加載濃度、時(shí)間和溫度需根據(jù)經(jīng)驗(yàn)來(lái)調(diào)整。總的來(lái)說(shuō),以能達(dá)到檢測(cè)需求的低濃度佳。通過(guò)降低加載溫度能減緩亞細(xì)胞區(qū)室化現(xiàn)象。

2.1 細(xì)胞懸液或玻片上準(zhǔn)備活細(xì)胞;

2.2 用適當(dāng)緩沖液或新鮮培養(yǎng)基(不含血清和酚紅)稀釋DMSO儲(chǔ)存液。建議起始工作濃度范圍是1-10μM

2.3 用稀釋好的DAF-FM DA工作液孵育細(xì)胞20~60min,孵育溫度為4~37℃。貼壁細(xì)胞不需消化后再加載。

2.4 PBS, pH 7.4充分清洗細(xì)胞直-去除多余探針。更換新鮮緩沖液或培養(yǎng)基再孵育15~30min,使得細(xì)胞內(nèi)酯酶能將探針充分去酯化。

2.5 激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)分別是495515nm。因這些波長(zhǎng)與熒光素(fluorescein)非常相似,因此,適用于熒光素(fluorescein)或FITC的檢測(cè)系統(tǒng)都行。

cas254109-22-3DAF-FM DA ,一種NO熒光探針

DAF-FM DA

DAF-FM 雙乙酸鹽

二氨基熒光素-FM 二乙酸酯

4-Amino-5-(N-methylamin)-3,6-bis(acetyloxy)

4-Amino-5-(N-methylamino)-3,6-bis(acetyloxy)-2,7-difluoro-spiro[isobenzofuran-1(3H),9-[9H]xanthen]-3-one;DAF-FMDAsolution

DAF-FMDA(cellpermeable)

-[9H]xanthen]-3-one

4-Amino-5-(N-methylamino)-3;7;9

DAF-FM DA

DAF-FM DA探針

DAF-FM DA(NO熒光探針)

DAF-FM DA顏色

DAF-FM DA怎么用

DAF-FM DA怎樣結(jié)合在納米載體上

DAF-FM DA操作使用步驟

一氧化氮合成酶(NOS)測(cè)試盒(DAF-FM DA探針?lè)?/span>)

DAF-FM DA染色后多久檢測(cè)

DAF-FM DA的溶解度

NO染料DAF-FM DA染色的實(shí)驗(yàn)

DAF-FM DA稀釋液

DAF-FM DA 一氧化氮(NO)熒光探針

daf-fm da使用要點(diǎn)


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