DiO(細胞膜綠色熒光探針)
產(chǎn)品介紹: Neuro-DiO 是一種代替膜綠色熒光染料DiO 的新型染料,DiO 由于其溶解度低、易形成聚合物和橫向擴散速度緩慢等缺點,很難用于神經(jīng)元和細胞懸液的研究。Neuro-DiO和 DiO 具有幾乎相同的吸收光譜和發(fā)射光譜,但前者具有更好的膜溶解性,并且不形成非熒光性的聚集體
產(chǎn)品參數(shù):
外觀:可溶于乙醇、己烷、DMSO 或植物油的橙黃色固體
λEx/λ Em(MeOH) = 484/501 nm
貯存條件:4℃ 避光保存
保質(zhì)期:12 個月
分子式:C16H17Cl2N5
分子量:1086
產(chǎn)品描述:DiO是一種親脂性的熒光染料,可以用來染細胞膜和其它脂溶性生物結(jié)構(gòu)進入細胞膜后,DiO在整個細胞膜上擴散,佳濃度時可以使整個細胞膜染色。DiO在進入細胞膜之前熒光非常弱,當與細胞膜結(jié)合后其熒光強度大大增強,DiO被激發(fā)后可以發(fā)出綠色的熒光,具有很高的淬滅常數(shù)和激發(fā)態(tài)壽命??梢杂脴藴实?nbsp;FITC濾光片檢測。DiO通常不會明顯影響細胞的生存力(viability),因此被廣泛用于正向或逆向的,活的或固定的神經(jīng)等細胞或組織的示蹤劑或長期示蹤劑(long-term tracer)。除了簡單的細胞膜熒光標記外,還可以用于檢測細胞的融合和粘附,檢測發(fā)育或移植過程中細胞遷移,通過FRAP(Fluorescence Recovery After Photobleaching)檢測脂在細胞膜上的擴散,檢測細胞毒性和標記脂蛋白等。
產(chǎn)品性質(zhì)
同義名 | DiOC18(3),DiO perchlorate | Cas No. | 34215-57-1 |
分子式 | C53H85ClN2O6 | 分子量 | 881.7 |
Ex/Em | 484/501 nm | 推薦濾光器 | XF23-Omega, 31001-Chroma |
運輸與保存方法
冰袋(wet ice)運輸。產(chǎn)品-20 oC干燥避光保存,一年。
使用方法
1. 染色液制備
(1)配置DMSO或EtOH 儲存液:儲存液用 DMSO或EtOH配置濃度1~5 mM。
注意:未使用的儲存液保存在-20℃,分裝保存,避免反復凍融。
(2)工作液制備:用合適的緩沖液(如:無血清培養(yǎng)基,HBSS或PBS)稀釋儲存液,配制濃度為1~5 μM的工作液。
注意:工作液終濃度是根據(jù)不同細胞和實驗的經(jīng)驗來配制??蓮耐扑]濃度的十倍以上找佳條件。
2. 懸浮細胞染色
(1)懸浮細胞密度為 1 × 106/mL加入到工作液中。
(2)在37 ℃培養(yǎng)細胞 2~20分鐘,不同的細胞佳培養(yǎng)時間不同。
(3)染色細胞試管在1000~1500轉(zhuǎn)離心5分鐘。
(4)傾倒上清液,再次緩慢加入預溫37℃的培養(yǎng)液。
(5)重復(3),(4)步驟兩次以上。
3. 粘壁細胞的染色
(1)使粘壁的細胞在無菌實驗室培養(yǎng)。
(2)從培養(yǎng)基中移走蓋玻片,吸走過量培養(yǎng)液,將蓋玻片放在潮濕的環(huán)境中。
(3)在蓋玻片的一角加入100μL的染料工作液,輕輕晃動使染料均勻覆蓋所有細胞。
(4)在37 ℃培養(yǎng)細胞 2~20分鐘,不同的細胞佳培養(yǎng)時間不同。
(5)吸干染料工作液,用培養(yǎng)液洗蓋玻片2~3次,每次用預溫的培養(yǎng)基覆蓋所有細胞,培養(yǎng)5~10分鐘,然后吸干培養(yǎng)基。
4. 顯微鏡檢測
(1)DiD,DiO,DiI,DiR和DiS濾光器的選擇參見表1。
(2)多色染料的同時檢測,濾光器按照以下設定:
a) DiI和DiO=Omega XF52,Chroma 51004;
b) DiI和DiD=Omega XF92,Chroma 51007;
c) DiI,DiO和DiD=Omega XF93,Chroma 61005
5. 流式細胞儀檢測
染色的細胞可以分別用的FL1,F(xiàn)L2,F(xiàn)L3和FL4流式細胞儀檢測。
注意事項
1) 熒光染料均存在淬滅問題,請盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。
2) 為了您的和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
3-十八烷基-2-[3-(3-十八烷基-2(3H)-苯并惡唑-2-亞基)-1-丙烯-1-基]苯并惡唑高氯酸鹽
細胞膜綠色熒光探針(DIO)
DIO高氯酸鹽
DIO細胞膜熒光探針綠色
DID高氯酸鹽
DIO(細胞膜綠色熒光探針)
3,3`-雙十八烷基氧碳花菁高氯酸鹽
3,3'-二-N-十八烷基氧代羰花青高氯酸鹽
3,3’-dioctadecyloxacarbocyanine
N,N'-DIOCTADECYLOXACARBOCYANINEPERCHLORATE
NK3045
DIOC18(3)
DIO
D275
BENZOXAZOLIUM,3-OCTADECYL-2-[3-(3-OCTADECYL-2(3H)-BENZOXAZOLYLIDENE)-1-PROPENYL]-,PERCHLORATE
BENZOXAZOLIUM,3-OCTADECYL-2-[3-(3-OCTADECYL-2-BENZOXAZOLINYLIDENE)PROPENYL]-,PERCHLORATE
DiO熒光染料
DiO波長
DiO說明書
DiO染料 pH穩(wěn)定性
DiO激發(fā)波長
DiO染料顏色
dio染料配制1mM