介紹四種量子點標記抗體方法
具體為一種量子點標記免疫球蛋白的方法,包括清洗量子點、活化、二次清洗量子點、清洗免疫球蛋白、偶聯和分離步驟。利用水溶性量子點的結構特征和EDC活化羧基的反應特點,以及縮合反應的反應特點,通過優化各個步驟的條件,使量子點表面的羧基得到充分的活化并處于合適的標記環境中;通過優化偶聯步驟的條件,使量子點通過縮合反應均能結合到免疫球蛋白的表面,
量子點的標記方法量子點可以與特定抗體或小分子結合,在不改變其化學特性的情況下,受到光源激發后可發出特定波長的熒光,通常有以下幾種方法:靜電吸引法、常規交聯劑連接法及生物素-親和素法等 。
(一)靜電吸引法正電荷氫核遇到另一個電負性強的原子時,產生靜電吸引。巰基乙酸修飾的量子點表面帶負電,與帶正電的蛋白質表面區域可通過靜電吸引連接起來,而不需要其他試劑。對于帶中性電荷的蛋白質,可以通過改造蛋白質在其末端構建帶正電荷的結構,使其能靜電吸附于量子點表面。另外,通過對量子點表面修飾使其帶負電荷后,除了上述的直接靜電吸引靶標物質外,還可以靜電吸附連接上親和素,然后依靠生物素-親和素的高特異性結合,間接將量子點連接到蛋白質分子上。
(二)常規交聯劑連接法交聯劑是一類小分子化合物,相對分子質量一般在200~600u,具有兩個或者更多的針對特殊基團(如氨基、巰基等)的反應性末端,可以和兩個或者更多的分子偶聯從而使這些分子結合在一起。
(三)生物素-親和素法
生物素-親和素系統(biotin-avidinsystem,BAS)是由于它具有生物素與親和素之間的高度親和力及多級放大效應,并與熒光素、酶、同位素等免疫標記技術有機地結合起來,使各種示蹤免疫分析的特異性和靈敏度進一步提高。
(四)其他標記方法
(五)利用異源雙功能交聯劑琥珀酰亞胺-4-(N-馬來酰亞胺甲基)-環己烷-1-羧酸鹽把量子點與抗體或配體的巰基通過縮合反應偶聯到一起,用于毛細血管電泳法測定人IgM,效果良好。量子點標記后,通常要分析鑒定標記物的質量,通常采用的方法有光譜分析和瓊脂糖電泳法。
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西安齊岳生物科技有限公司可以提供量子點表面修飾小分子/量子點表面修飾糖類小分子/量子點表面修飾功能性小分子/PEG化的量子點/咪唑修飾的石墨烯量子點/氨基-甲酰基咪唑修飾還原石墨烯等定制量子點產品。提供不同表面配體的核殼型熒光量子點產品包括有:十八胺、alkyl、油酸、氨基和羧基。我們的Fluorescent nanocrystals產品還包括脂溶性的和水溶性的,水溶性的是通過包裹一層聚乙二醇PEG而實現水溶性的,表面可以修飾氨基和羧基。
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