FITC-NHS;綠色熒光素標記活性酯;FITC-活性酯;Fluorescein-NHS
FITC標記蛋白方法:
(1)將待交聯的蛋白(濃度≥1mg/mL)對交聯反應液透析三次4℃,至pH=9.0。交聯反應液配制方法:7.6gNaHCO3,1.06gNa2CO3,7.36gNaCl,加水定容至1L。
(2)將FITC溶于DMSO中,濃度為1mg/mL。每次交聯使用的FITC均應新鮮配制,避光。
(3)按P:F(蛋白質:FITC)=1mg:150μg的比例將FITC緩慢加入于抗體溶液中,邊加邊輕輕晃動使其與抗體混合均勻,暗處4℃反應8h。
(4)加入5mol/L的NH4CL至終濃度50mmol/L,4℃終止反應2h。
(5)將交聯物在PBS中透析四次以上,至透析液清亮。
(6)交聯物的鑒定
產品名稱:異硫氰酸熒光素-活性脂
英文名稱:Fluorescein-NHS
外觀:固體粉末
熒光顏色:綠色熒光
激發波長:494nm
發射波長:520nm
溶解性,溶于有機溶劑
用途:僅用于科研實驗,禁用于人體實驗
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