FITC標記蛋白方法：

（1）將待交聯的蛋白（濃度≥1mg/mL）對交聯反應液透析三次4℃，至pH=9.0。交聯反應液配制方法：7.6gNaHCO3，1.06gNa2CO3，7.36gNaCl，加水定容至1L。

（2）將FITC溶于DMSO中，濃度為1mg/mL。每次交聯使用的FITC均應新鮮配制，避光。

（3）按P:F（蛋白質：FITC）=1mg:150μg的比例將FITC緩慢加入于抗體溶液中，邊加邊輕輕晃動使其與抗體混合均勻，暗處4℃反應8h。

（4）加入5mol/L的NH4CL至終濃度50mmol/L，4℃終止反應2h。

（5）將交聯物在PBS中透析四次以上，至透析液清亮。

（6）交聯物的鑒定

蛋白濃度（mg/mL）=[A280-0.31×A495]/1.4

F/P比例：3.1×A495/[A280-0.31×A495]，該值應介于2.5～6.5之間。

（7）FITC交聯的蛋白應置于Ph7.4的磷酸鹽緩沖液中，加入0.1%NaN3、1%BSA,4℃避光保存。

FITC異硫氰酸熒光素是一種黃色粉末狀的熒光染料，激發波長為494 nm左右，具有高吸收率、優良的熒光量子產率和良好的水溶性等特點。

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