活性氧的測定方法
在生物系統中,游離活性氧量很低,因此測定時需要靈敏的方法如脈沖射解、電子自旋共振等技術,但儀器較昂貴。由線粒體產生的H2O2,存在時間較長,能使DCFH探針的熒光物被氧化成DCF(二氯熒光素雙乙酸鹽),DCF可被酯酶裂解成二氯熒光素,以二氯熒光素為基礎的熒光法,可檢測H2O2、O2-和OH-,這種方法較簡單,但特異性較低。
活性氧(reactiveoxygenspecies,ROS)是O2,帶電子后的產物,包括氧的一電子產物氧負離子O2-、二電子產物過氧化氫(H2O2,)、三電子產物羥基自由基(OH-)、一氧化氮等,半衰期較短,脂溶性。體內活性氧主要是在線粒體電子傳遞鏈由Ⅲ狀態向狀態IV轉換中產生,線粒體高O2的環境,使高還原態的呼吸鏈有電子由呼吸鏈底物端和氧端漏出,并交給O2,而生成O2-。正常時,約2%的氧參與活性氧的產生;生理條件下,適量的活性氧可促進免疫、修復、存活、生長等。消除活性氧的抗氧化體系分為酶系和非酶系,酶系有超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)、谷胱甘肽過氧化物酶(GPx)等,非酶系主要是還原型谷胱甘肽(GSH)、維生素C/E等。細胞內高水平谷胱甘肽GSH,CAT(H2O2酶)、谷胱甘肽過氧化物酶(GPx)、超氧化物歧化酶SOD、環孢素、抗凋亡因子Bcl-2,可下調活性氧的產生水平
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