SYBR Green I是一種結(jié)合于所有dsDNA雙螺旋小溝區(qū)域的具有綠色激發(fā)波長的染料。在游離狀態(tài)下,SYBR Green I發(fā)出微弱的熒光,但一旦與雙鏈DNA結(jié)合后,熒光大大增強(qiáng)。因此,SYBR Green I的熒光信號強(qiáng)度與雙鏈DNA的數(shù)量相關(guān),可以根據(jù)熒光信號檢測出PCR體系存在的雙鏈DNA數(shù)量。SYBR Green I 的**吸收波長約為497nm,發(fā)射波長**約為520nm。
基本參數(shù)
【中文名】SYBRGREENⅠ核苷酸膠體染料
【中文同義詞】SYBRGREEN1熒光染料/SYBRGREENⅠ核苷酸膠體染料/SDNA核苷酸染液/GREEN-DNADYE核苷酸膠體染料;SYBR綠色I(xiàn)I核苷酸膠體染料;核苷酸膠體染料;SYBRGREEN1熒光染料;SYBR綠色I(xiàn)DNA染色液;GREEN-DNADYE核苷酸膠體染料;SDNA核苷酸染液;SYBRGREENⅠ核苷酸膠體染料
【英文名】SYBR Green I
SYBRGREENⅠ核苷酸膠體染料物理化學(xué)性質(zhì)
【分子式】C32H37N4S
【分子量】509.727
【結(jié)構(gòu)式】
【質(zhì)量】509.273346
【PSA】 44.35000
【LogP】5.42750
【特點(diǎn)】
高靈敏:至少可檢出20pg DNA,高于EB染色法25-100倍。
信噪比高:樣品熒光信號強(qiáng),背景信號低。
操作簡單:無須脫色或沖洗。
適用范圍廣:可適用于多種電泳分析。
使用方便:不影響其它修飾酶作用。
經(jīng)濟(jì):價(jià)格比銀染便宜。
【使用方法】
預(yù)染方法
1. 該方法適用于瓊脂糖凝膠電泳和PAGE凝膠電泳
2. 工作液的配制:用電泳緩沖液將10000×的SYBR GreenⅠ稀釋100倍,即為SYBR GreenⅠ工作液。SYBR GreenⅠ工作液可以置2-8℃冷藏一個(gè)月以上。
3. 制膠:按常規(guī)方法制膠,不含任何染料。
4. 樣品染色:向分析樣品中加入SYBR GreenⅠ工作液和載樣緩沖液,室溫放置10分鐘,使SYBR GreenⅠ與樣品中DNA充分結(jié)合。SYBR GreenⅠ工作液加入量為總上樣量的1/10。
5. DNA Marker染色:將5μL DNA Marker和1μLSYBR GreenⅠ工作液混勻,室溫放置5分鐘,使SYBR GreenⅠ與DNA充分結(jié)合。
6. 上樣、電泳:按常規(guī)操作。
7.檢測:用ABLUe可見光核酸檢測儀器檢測
后染方法
1. 按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳。
2. 用PH 7.0 - 8.5 的緩沖液(如:TAE,TBE 或 TE),按照10000:1的比例稀釋SYBR GreenⅠ濃縮液,混勻,制成染色溶液。
3. 將染色溶液倒入合適的聚丙烯容器中,放入凝膠,用鋁箔等蓋住容器使染料避光。室溫振蕩染色10-30分鐘,染色時(shí)間因凝膠濃度和厚度而定。聚丙烯酰胺凝膠直接在玻璃平皿上染色,將配好的工作溶液輕輕地倒在膠板上,讓工作液均勻地覆蓋整個(gè)膠板,并染色30分鐘。玻璃平皿必須預(yù)先經(jīng)過硅烷化溶液處理(避免染料吸附在玻璃表面上)。
4. 用ABLUe觀測。藍(lán)光可透過玻璃,觀測聚丙烯酰胺凝膠時(shí),可直接將托有凝膠的玻璃平皿放入ablue內(nèi)觀測。
CDP Star 160081-62-9
CSDP 142456-88-0
(4-氯苯巰基)(10-甲基-9,10-二氫化吖啶亞甲基)磷酸二鈉鹽/APS-5 193884-53-6
吖啶鹽(NSP-SA-NHS) ?199293-83-9
吖啶酯(NSP-DMAE-NHS) 194357-64-7
AMPPD系列
SYBR Green I 163795-75-3?
PICO Green 177571-06-1
3-[3-(膽酰胺丙基)二甲氨基]丙磺酸內(nèi)鹽(CHAPS) ?75621-03-3
2-丁酮酸鈉鹽;2-羰基丁酸鈉鹽;a-丁酮酸鈉鹽 2013-26-5
β-雌二醇-3-(β-D-葡萄糖苷酸)鈉鹽 14982-12-8
TOOS 82692-93-1
N-(2-羥基-3-磺丙基)-3'5-二甲氧基苯胺鈉鹽 82692-88-4
磷酸烯醇式丙酮酸單環(huán)己胺鹽 10526-80-4
4-硝基苯基磷酸雙[三(羥甲基)甲胺]鹽水合物 68189-42-4
4-甲基香豆素基-α-D-唾液酸鈉鹽 76204-02-9
甘油-L-脯氨酸 704-15-4
(4-硝基苯基)-Α-D-麥芽六糖苷 74173-30-1
2-氯-4-硝基苯-α-半乳糖-麥芽二糖苷
2-氯-4-硝基苯基 2-(乙酰氨基)-2-脫氧-BETA-吡喃葡萄糖苷 103614-82-0
6-甲基-2-吡啶基 2-(乙酰氨基)-2-脫氧-1-硫代-BETA-D-吡喃葡萄糖苷 149263-94-5
10-(羧甲基氨基羰基)-3,7-雙(二甲氨基)吩噻嗪鈉鹽 115871-18-6
4-氨基-3-肼-5-巰基-1,2,4-三唑(AHMT) 1750-12-5
N-(4-氨基丁基)-N-乙基異魯米諾/異魯米諾AEBI/異魯米諾 66612-29-1
8-苯氨基萘-1-磺酸銨鹽(ANS-NH4) 28836-03-5
以上內(nèi)容來自齊岳小編zzj 2021.7.1