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如何驗證色譜填料批次穩定性?
發布時間:2021-06-24     作者:axc   分享到:

無論是分析型**液相色譜還是制備或生產型液相色譜,色譜柱和色譜填料的批次穩定性都是異常重要的,因此色譜柱和色譜填料的批次穩定性一直是使用者最擔心的問題。

證明色譜填料批次穩定性有很多方法,可以從外形,物理方法、化學方法、柱效測試、小試上樣等,但是這中間很多方法都會受色譜柱裝填技術等制約,所以實現起來比較難。

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而**方便快捷且可行性較好的判斷色譜柱和色譜填料批次穩定性的方法就是考察標準測試方法下的多個標準品的保留時間、相對保留時間和分離度。

靠譜的方法:

不同批次的色譜填料,各裝填一根小柱子,找一個標準方法和標準品組合,比如柱效測試的混標組合,或者常用模式蛋白組合,在不同批次色譜填料裝填的柱子上各運行一個小進樣量的標準進樣,進樣量以各標準品或標準蛋白洗脫峰基線分離為宜。
然后就是對標準運行結果的對比和判斷,**,判斷各標準品或模式蛋白在不同批次填料裝填的小柱子上的洗脫峰的保留時間是不是有明顯差異。
原則上如果不同批次的填料在裝柱前的量取、裝柱過程和結果沒有明顯差異的情況下,批次穩定性好的填料的保留時間一致性很好。但是在填料裝柱量和裝柱效果存在一定差異的情況下,即使各標準品或模式蛋白的保留有所差異,由于他們在相同填料的保留因子相同,因此各峰在不同批次填料預裝小柱上的相對保留應該差異不明顯。
若發現標準測試且徹底平衡的情況下,不同批次填料各標準品的相對保留有明顯變化或者分離度有明顯變化,說明不同批次填料之間穩定性較差。

還有一個可以驗證的方法就是針對純化工藝的驗證,看不同批次填料小試純化結果的吻合度,尤其是看制備圖譜的重合度,重合度越高,批間穩定性越好,反之亦反。

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粉紅色酸洗硅藻土氣相填料Chromosorb P AW 60/80mesh

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白色非酸洗硅藻土擔體Chromosorb W NAW 80/100mesh

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