Cy5.5-phosphoramidite，CY5.5標記亞磷酰胺的反應步驟

Cy5.5-Phosphoramidite是一種基于近紅外熒光染料Cy5.5的亞磷酰胺衍生物，主要用于核酸合成中引入熒光標簽，便于熒光檢測與分子追蹤。亞磷酰胺化學作為固相寡核苷酸合成的核心步驟，涉及具有高反應活性的亞磷酰胺基團與核苷酸的羥基反應，形成磷酸酯鍵。將Cy5.5染料修飾于亞磷酰胺骨架，可實現熒光功能的核酸合成標記。

反應體系與底物

Cy5.5-Phosphoramidite常用于固相合成系統，其反應對象為游離5'-羥基的核苷酸或修飾核酸。合成一般在惰性氣氛（如氮氣或氬氣）中進行，防止亞磷酰胺基團被水分水解。

反應溶劑與條件

反應多在無水有機溶劑中進行，如無水的二氯甲烷（DCM）、乙腈（ACN）或二甲基甲酰胺（DMF）。保持反應體系極度干燥，避免水分導致的亞磷酰胺水解，降低產率。溫度通常控制在室溫（20–25℃），以保證亞磷酰胺的活性和核苷酸的穩定性。

反應步驟

將Cy5.5-Phosphoramidite與5'-羥基的核苷酸固相支持物接觸，在催化劑（如四乙基胺鹽或二苯基磷酰氯）輔助下，亞磷酰胺基團活化并與羥基發生親核加成反應，生成磷酸三酯鍵。

反應時間一般為1-3分鐘，快速且高效，確保鏈延伸的準確性。

反應完成后，加入氧化劑（如碘溶液）氧化磷酸三酯成更穩定的磷酸酯結構。

反應控制要點

無水環境：反應中任何水分均可導致亞磷酰胺水解，產生副產物，降低合成效率。

催化劑和氧化劑的選擇：保證反應選擇性和產物穩定性，催化劑用量需精確控制。

反應時間與溫度：控制合成周期，避免染料或核酸降解。

純化處理：合成后采用高效液相色譜（HPLC）純化，去除未反應物和副產物。

光學與化學穩定性

產品名稱：Cy5.5-phosphoramidite，CY5.5標記亞磷酰胺

純度：95%+

性狀：固體或液體

儲藏條件：-20°C干燥避光保存

包裝規格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

廠家：齊岳生物

關于我們

齊岳生物供應近紅外熒光花菁染料標記各種官能團的定制服務，如活性酯（NHS酯）、馬來酰亞胺（MAL）、疊氮（N?）、炔基（alkyne）等，便于與蛋白質、肽、多糖、抗體、寡核苷酸、納米顆粒等共價偶聯。可選擇多種功能團與目標分子進行精準結合，實現對蛋白質、多肽、抗體、核酸或納米材料的熒光修飾。此外，齊岳生物還提供定制染料標記服務，包括肽類、蛋白類、小分子、糖類等不同類型標的物，滿足用戶在科研、成像等多方面的個性化應用。

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