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CY5.5-SBA,CY5.5標記大豆凝集素的合成步驟
發布時間:2025-08-07     作者:axc   分享到:

CY5.5-SBA,CY5.5標記大豆凝集素的合成步驟

CY5.5-SBA 是由大豆來源的植物凝集素——大豆凝集素(Soybean Agglutinin, SBA)與近紅外熒光染料 CY5.5 通過共價連接方式標記而成的熒光探針。SBA 是一種糖結合蛋白,特異性識別N-乙酰半乳糖胺結構,用于糖鏈研究和細胞標記。將其與CY5.5標記后,可賦予其近紅外熒光特性,適用于深層組織成像及糖鏈分布可視化研究。

CY5.5-SBA 的合成主要利用SBA分子表面存在的賴氨酸殘基上的伯胺,與CY5.5的活性NHS酯反應形成穩定的酰胺鍵。合成步驟如下:

緩沖液準備:將SBA溶解于pH 8.3的碳酸氫鈉緩沖液中(通常濃度在1–2 mg/mL),該pH條件有利于胺基去質子化,從而增強反應活性。

CY5.5-NHS酯溶解與反應:將CY5.5-NHS ester溶于少量無水DMSO或DMF中,緩慢滴加至SBA溶液中。為了控制標記程度,染料與SBA的摩爾比通常設置在1:3至1:10之間。反應在避光條件下于室溫攪拌2小時。

終止反應與純化:反應結束后,可加入少量甘氨酸或Tris以封閉未反應的NHS酯殘基。之后使用凝膠過濾(如Sephadex G-25)或超濾離心管(10 kDa截留)進行分離,去除游離染料。

產物表征:標記后的SBA溶液呈紫紅色,可通過紫外-可見吸收光譜確認CY5.5的吸收峰(約675 nm),發射峰約695–710 nm。使用SDS-PAGE可確認蛋白完整性未受破壞,并通過BCA或Bradford方法定量蛋白濃度。

熒光度計算:可通過光譜積分分析染料與蛋白的結合率(D/P ratio),判斷標記成功與否并優化反應條件。

CY5.5-SBA 可用于細胞膜糖鏈的近紅外成像、腫瘤微環境模型構建以及糖相關細胞識別機制的動態觀察研究,是一種穩定、高靈敏度的熒光糖鏈探針。

產品名稱:CY5.5-SBA,CY5.5標記大豆凝集素

純度:95%+

性狀:固體或液體

儲藏條件:-20°C干燥避光保存

包裝規格:50mg  100mg  250mg  500mg(按需提供)

廠家:齊岳生物

CY5.5-SBA

關于我們

齊岳生物供應近紅外熒光花菁染料標記各種官能團的定制服務,如活性酯(NHS酯)、馬來酰亞胺(MAL)、疊氮(N?)、炔基(alkyne)等,便于與蛋白質、肽、多糖、抗體、寡核苷酸、納米顆粒等共價偶聯。可選擇多種功能團與目標分子進行精準結合,實現對蛋白質、多肽、抗體、核酸或納米材料的熒光修飾。此外,齊岳生物還提供定制染料標記服務,包括肽類、蛋白類、小分子、糖類等不同類型標的物,滿足用戶在科研、成像等多方面的個性化應用。

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