Cy3-labeled,CY3標記的纖維蛋白的反應步驟
產品名稱:Cy3-labeled,CY3標記的纖維蛋白
純度:95%+
Cy3-labeled 纖維蛋白是將熒光染料CY3通過共價方式標記到纖維蛋白分子上的衍生復合物,用于凝血網絡成像、材料構建及分子定位分析。纖維蛋白是由纖維蛋白原(Fibrinogen)經凝血酶作用后聚合形成的纖維狀蛋白質,在pH中性或略偏堿的條件下穩定,含有多種賴氨酸與酪氨酸殘基,可作為化學修飾位點。
CY3染料常以NHS酯活性形式參與偶聯,能夠與蛋白質上的伯胺基形成穩定酰胺鍵。標記步驟一般包括以下幾個關鍵階段:
緩沖體系準備:將纖維蛋白溶解于適合反應的緩沖液中,常用的是碳酸鹽或磷酸鹽緩沖液(pH 8.3 左右),該環境利于NHS酯與氨基反應,同時不影響蛋白空間結構。
染料溶液配制:CY3-NHS酯溶于無水DMSO或DMF中,以防止水解失活,并保持其反應活性。使用前需現配,避免長時間儲存。
偶聯反應進行:將CY3染料溶液逐滴加入纖維蛋白溶液中,并輕緩攪拌。在避光條件下反應0.5至2小時,溫度控制在室溫或4°C,以防蛋白變性。
反應終止與純化:可通過添加甘氨酸或Tris緩沖液中和未反應的NHS酯,終止反應后使用透析、超濾離心或凝膠過濾柱清除游離染料分子,獲得純化后的Cy3-纖維蛋白。
表征與驗證:使用紫外-可見光譜檢測其550–555 nm處的吸收峰以確認標記成功,同時可通過SDS-PAGE結合熒光成像驗證標記蛋白條帶。
該方法可控制標記密度,以實現既能保證熒光信號,又不干擾其聚合與交聯能力。標記后的纖維蛋白常用于構建熒光凝膠網絡、觀察組織模擬結構或在微流控芯片中作為示蹤因子。
性狀:固體或液體
儲藏條件:-20°C干燥避光保存
包裝規格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
廠家:齊岳生物
關于我們
齊岳生物供應近紅外熒光花菁染料標記各種官能團的定制服務,如活性酯(NHS酯)、馬來酰亞胺(MAL)、疊氮(N?)、炔基(alkyne)等,便于與蛋白質、肽、多糖、抗體、寡核苷酸、納米顆粒等共價偶聯。可選擇多種功能團與目標分子進行精準結合,實現對蛋白質、多肽、抗體、核酸或納米材料的熒光修飾。此外,齊岳生物還提供定制染料標記服務,包括肽類、蛋白類、小分子、糖類等不同類型標的物,滿足用戶在科研、成像等多方面的個性化應用。
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僅供科研,不能用于人體實驗AXC.2025.06.23