Cy3-trichosanthin,CY3標(biāo)記的天花粉蛋白的合成過(guò)程研究
產(chǎn)品名稱:Cy3-trichosanthin,CY3標(biāo)記的天花粉蛋白
純度:95%+
Cy3-trichosanthin是將花菁染料CY3共價(jià)標(biāo)記于天花粉蛋白(Trichosanthin)上的熒光蛋白復(fù)合物,常用于細(xì)胞行為研究、蛋白傳遞機(jī)制探索及納米遞送系統(tǒng)開(kāi)發(fā)。天花粉蛋白是一種約27 kDa的單鏈核糖體失活蛋白,具有穩(wěn)定的α-螺旋與β-折疊結(jié)構(gòu),分子表面富含賴氨酸與半胱氨酸等官能團(tuán),是進(jìn)行共價(jià)標(biāo)記的理想對(duì)象。
合成CY3-trichosanthin的過(guò)程包括蛋白溶液預(yù)處理、染料活化、共價(jià)偶聯(lián)和后處理純化幾個(gè)步驟。首先將重組表達(dá)或提取得到的天花粉蛋白溶解于適當(dāng)緩沖液中(如PBS或碳酸鹽緩沖液),調(diào)節(jié)pH至8.0,以利于賴氨酸殘基與染料反應(yīng)。隨后將CY3-NHS酯在少量DMSO中溶解后緩慢滴加到蛋白溶液中,確保反應(yīng)的均勻性和控制標(biāo)記度。
反應(yīng)時(shí)間通常設(shè)定為1–2小時(shí),反應(yīng)完成后通過(guò)凝膠過(guò)濾或超濾方式去除游離染料。CY3-trichosanthin的純化與質(zhì)量評(píng)估可通過(guò)SDS-PAGE配合熒光掃描、電噴霧質(zhì)譜或紫外-可見(jiàn)吸收光譜進(jìn)行。標(biāo)記成功的樣品在550 nm處呈現(xiàn)特征吸收峰,可通過(guò)吸光度比值計(jì)算標(biāo)記效率。
為了確認(rèn)蛋白功能是否受標(biāo)記影響,可進(jìn)行酶活性測(cè)定、結(jié)構(gòu)分析(如CD光譜)或細(xì)胞攝取實(shí)驗(yàn)。CY3標(biāo)記位于蛋白質(zhì)表面區(qū)域,不易干擾其功能域,使其適用于后續(xù)的細(xì)胞熒光成像、遞送效率評(píng)估及受體識(shí)別研究。該標(biāo)記策略為研究天花粉蛋白在細(xì)胞內(nèi)的行為提供了熒光工具,也有助于其在多功能生物材料體系中的應(yīng)用拓展。
性狀:固體或液體
儲(chǔ)藏條件:-20°C干燥避光保存
包裝規(guī)格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
廠家:齊岳生物
關(guān)于我們
齊岳生物供應(yīng)近紅外熒光花菁染料標(biāo)記各種官能團(tuán)的定制服務(wù),如活性酯(NHS酯)、馬來(lái)酰亞胺(MAL)、疊氮(N?)、炔基(alkyne)等,便于與蛋白質(zhì)、肽、多糖、抗體、寡核苷酸、納米顆粒等共價(jià)偶聯(lián)。可選擇多種功能團(tuán)與目標(biāo)分子進(jìn)行精準(zhǔn)結(jié)合,實(shí)現(xiàn)對(duì)蛋白質(zhì)、多肽、抗體、核酸或納米材料的熒光修飾。此外,齊岳生物還提供定制染料標(biāo)記服務(wù),包括肽類、蛋白類、小分子、糖類等不同類型標(biāo)的物,滿足用戶在科研、成像等多方面的個(gè)性化應(yīng)用。
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