Cyanine2 NHS Ester（Cy2 NHS Ester）是一種綠色熒光染料的活性酯形式，廣泛應用于生物分子的共價標記，特別是蛋白質、肽、核酸、糖類等含伯胺基團的分子。

其結構來源于Cyanine2染料家族，通過連接N-羥基琥珀酰亞胺（NHS）酯基團，使得該染料在生物標記和熒光成像方面具有優異的反應性和光學性能。

英文名 CY2-SE

CAS號 186205-33-4

分子量 643.469

分子式 C29H30IN3O6

熔點 N/A

反應活性與偶聯機理

Cyanine2 NHS Ester 的NHS酯基團是非常常見的伯胺偶聯基團，可在中性或弱堿性（pH 7.5–8.5）條件下與蛋白質或其他生物分子上的伯胺（–NH?）反應，生成穩定的酰胺鍵。這一反應機制具有以下特點：

高專一性：主要與伯胺反應，不易與其他官能團交叉反應；

反應溫和：無需使用催化劑或強堿；

偶聯效率高：在適宜條件下反應速率快，通常幾小時內即可完成；

生成產物穩定：生成的酰胺鍵在生理條件下非常穩定。

應用領域

1. 蛋白質和抗體標記

Cy2 NHS Ester廣泛用于蛋白質（如IgG、BSA等）的熒光標記，可用于后續的免疫熒光（IF）、免疫沉淀（IP）、免疫印跡（Western blot）等實驗。

2. 核酸和寡核苷酸標記

通過與含氨基修飾的寡核苷酸進行偶聯，實現核酸探針的構建，適用于熒光原位雜交（FISH）或實時熒光PCR等分子生物學應用。

3. 細胞標記與成像

Cy2標記的分子探針可用于活細胞或固定細胞的成像研究，如細胞器定位、膜標記、胞吞路徑研究等。

4. 流式細胞術（FACS）

Cy2-labeled抗體可用于流式分析中綠色通道檢測，是FITC的理想替代者，具有更高的光穩定性。

5. FRET實驗

Cy2作為供體染料可用于FRET研究，常與Cy3、Cy5等染料組合用于探測分子間相互作用。

6. 功能材料修飾

如用于納米粒子、聚合物、生物傳感器材料的熒光功能化，用于構建可視化診斷與監測系統。

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