Rhodamine X Amine,簡稱氨基ROX,是一種衍生自羅丹明(Rhodamine)染料的含氨基官能團的熒光化合物。ROX染料屬于羅丹明類熒光染料家族,具有光學性能和良好的化學穩定性,常被用作熒光探針、分子標記和熒光定量分析中的標準染料。
氨基ROX特指該染料分子上帶有可反應的游離氨基(–NH2)功能團,為其后續的共價偶聯提供了化學活性,使其能方便地與多種生物大分子或材料連接。
化學結構與性質
分子結構
Rhodamine X是一類結構基于羅丹明的紅色熒光染料,具有典型的三苯基甲烷類共軛結構,賦予其強烈的紅色至橙紅色熒光。氨基ROX在分子結構上引入了一個游離的氨基基團(–NH2),該基團通常位于染料的側鏈位置,為后續的化學修飾、標記提供了反應位點。
物理化學性質
氨基ROX呈現良好的水溶性,具體取決于其鹽形式及溶劑環境。其激發與發射波長集中在可見光紅色區域,具備高熒光量子產率和良好的光穩定性。
活性基團
游離氨基是親核基團,能夠與多種活性化學基團(如NHS酯、異氰酸酯、異氟酸酯等)發生共價反應,實現分子的銜接與標記。
主要應用
分子標記與偶聯
氨基ROX因帶有游離氨基,常用于與活化的羧基(–COOH)基團結合,通過酰胺鍵實現共價偶聯。它可以標記蛋白質、多肽、核酸、抗體、載體分子等,成為分子探針和熒光標記工具。
熒光定量PCR(qPCR)探針
ROX染料常用作熒光參照染料(passive reference dye),幫助校正熒光信號變化,提高qPCR檢測的準確性和重復性。氨基ROX的穩定性和強烈熒光使其成為優質的標準染料。
熒光傳感器與生物傳感器
氨基ROX被用于設計熒光傳感器,通過共價連接特定識別元件,實現對環境變化、離子濃度、酶活性等的敏感檢測。
細胞及組織成像
通過與生物分子的偶聯,氨基ROX標記的探針可用于細胞內定位、追蹤和動態觀察,廣泛應用于熒光顯微鏡、流式細胞術和活體成像。
多色熒光分析
ROX染料的光譜特性使其能夠與藍色、綠色及黃綠色熒光染料組合,進行多通道、多重標記的熒光實驗。
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