CY3-Lectins,CY3標(biāo)記凝集素的反應(yīng)原理
CY3標(biāo)記的凝集素(Cy3-Lectins)是通過(guò)將熒光染料CY3共價(jià)偶聯(lián)于凝集素蛋白上的標(biāo)記產(chǎn)物。凝集素是一類(lèi)具有特異性識(shí)別糖類(lèi)結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì),用于糖生物學(xué)研究。通過(guò)將CY3與凝集素結(jié)合,能夠賦予其強(qiáng)烈的熒光信號(hào),方便對(duì)凝集素的分布、結(jié)合及動(dòng)態(tài)變化進(jìn)行實(shí)時(shí)觀察。
反應(yīng)原理基于CY3的NHS酯基團(tuán)與凝集素蛋白上的游離氨基發(fā)生酰胺鍵的形成。具體而言,NHS酯是一種活性酯,能在堿性緩沖液(通常pH 8.0-8.5)中與蛋白質(zhì)賴(lài)氨酸殘基的ε-氨基進(jìn)行親核攻擊,釋放NHS形成穩(wěn)定的共價(jià)鍵。此反應(yīng)具有高選擇性和較快的反應(yīng)速率,適用于溫和的生物條件。
為了確保偶聯(lián)效率,反應(yīng)常在避光條件下進(jìn)行,以防止CY3染料的光降解。反應(yīng)時(shí)間和染料與蛋白的摩爾比可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求調(diào)節(jié),以控制標(biāo)記度,保證蛋白結(jié)構(gòu)和功能的完整性。
偶聯(lián)完成后,通常采用透析、凝膠過(guò)濾或超濾等方法去除未反應(yīng)的游離染料及其他雜質(zhì),確保純度和標(biāo)記均一性。純化后的Cy3-Lectins可通過(guò)紫外-可見(jiàn)光譜和熒光光譜確認(rèn)標(biāo)記效果,并通過(guò)SDS-PAGE結(jié)合熒光成像進(jìn)一步驗(yàn)證。
整體反應(yīng)原理的設(shè)計(jì)既保證了標(biāo)記的高效性,也兼顧了蛋白功能的保留,使得Cy3標(biāo)記的凝集素在細(xì)胞成像、分子識(shí)別及糖鏈分析等多種生物學(xué)應(yīng)用中具有良好的表現(xiàn)。
產(chǎn)品名稱(chēng):CY3-Lectins,CY3標(biāo)記凝集素
純度:95%+
性狀:固體或液體
儲(chǔ)藏條件:-20°C干燥避光保存
包裝規(guī)格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
廠家:齊岳生物
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