CY3-Uroplakin,CY3標記尿路上皮蛋白的反應步驟
產品名稱:CY3-Uroplakin,CY3標記尿路上皮蛋白
純度:95%+
CY3標記的尿路上皮蛋白(Cy3-Uroplakin)制備通常通過CY3活性酯與尿路上皮蛋白分子上的氨基基團共價偶聯完成。尿路上皮蛋白屬于膜蛋白家族,含有多個賴氨酸殘基,為染料標記提供了反應位點。
反應步驟開始于尿路上皮蛋白的緩沖液配置,常采用pH 8.0至8.5的碳酸鹽緩沖液,以確保蛋白氨基處于非質子化狀態,提高親核活性。蛋白溶液需新鮮配制,保證蛋白結構穩定。
隨后,溶解于有機溶劑中的CY3-NHS酯緩慢滴加至蛋白溶液中,同時持續輕柔攪拌。反應一般在室溫下避光進行,持續時間為1至3小時,根據標記需求調整。適當的反應條件有利于實現高效偶聯,同時保持蛋白的構象。
反應結束后,采用透析、凝膠過濾色譜或超濾等方法去除游離的未反應染料及小分子雜質,獲得高純度的標記蛋白。純化步驟對保持蛋白功能和減少背景信號至關重要。
純化后的Cy3-Uroplakin通常通過紫外-可見分光光度計測定標記度和蛋白濃度,并利用熒光光譜分析確認熒光性質。SDS-PAGE結合熒光掃描可用來驗證標記的均一性和純度。
整個過程強調溫和的反應條件和精確的純化工藝,以確保標記蛋白的功能活性和結構完整性。通過合理控制染料與蛋白的摩爾比,可以調節標記度,實現不同實驗需求。
性狀:固體或液體
儲藏條件:-20°C干燥避光保存
包裝規格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
廠家:齊岳生物
關于我們
齊岳生物供應近紅外熒光花菁染料標記各種官能團的定制服務,如活性酯(NHS酯)、馬來酰亞胺(MAL)、疊氮(N?)、炔基(alkyne)等,便于與蛋白質、肽、多糖、抗體、寡核苷酸、納米顆粒等共價偶聯。可選擇多種功能團與目標分子進行精準結合,實現對蛋白質、多肽、抗體、核酸或納米材料的熒光修飾。此外,齊岳生物還提供定制染料標記服務,包括肽類、蛋白類、小分子、糖類等不同類型標的物,滿足用戶在科研、成像等多方面的個性化應用。
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僅供科研,不能用于人體實驗AXC.2025.06.23